背景皮肤鳞状细胞癌（cutaneous squamous cell carcinoma,CSCC）是一种常见的皮肤恶性肿瘤,目前发病机制尚未完全阐明。ID家族可通过抑制碱性螺旋环螺旋转录因子（basichelix-loop-helix,bHLH）结合DNA的能力,进而影响细胞增殖和分化等一系列生物学过程。近年来,ID家族与肿瘤的关系受到越来越多的关注。其中在TGF-β这一经典信号通路中,ID4被认为是BMP-SMAD-ID亚通路下游的关键基因,参与了肿瘤发生、发展和转移的过程。本课题组前期研究发现,BMP-SMAD-ID亚通路与CSCC形成具有明显相关性,与癌旁组织相比,ID4基因在CSCC组织中表达显著降低。据此,我们推测ID4基因可能具有抑癌基因作用。本研究旨在通过构建ID4基因过表达稳转细胞株,探究ID4基因在CSCC形成和发展过程中的作用。方法1.将ID4过表达质粒包装成高滴度慢病毒并进行滴度测定;2.用慢病毒分别感染A431、Colo16、HaCaT细胞,并通过实时荧光定量核酸扩增（qPCR）及蛋白印迹法（Western blot）鉴定转染后三种细胞中ID4基因表达情况;3.分别采用CCK-8、流式细胞仪、划痕实验、Transwell Insert侵袭性试验以及注射细胞裸鼠体内致瘤实验等方法比较感染ID4前后各组细胞在增殖、周期、凋亡、迁移、侵袭、致瘤能力等方面的变化。结果1.与阴性对照组相比,A431、Colo16、HaCaT细胞感染慢病毒后,ID4mRNA及蛋白表达显著增强,满足下一步实验要求;2.与阴性对照组相比,转染ID4的A431细胞增殖、迁移、侵袭能力均显著降低,凋亡水平显著增高,处于S期的细胞数量显著减少,裸鼠肿瘤发生迟4-8天,肿瘤体积较小;3.与阴性对照组相比,感染ID4的Colo16细胞增殖、迁移、侵袭能力均显著降低,凋亡水平显著增高,处于S期的细胞数量显著减少,裸鼠肿瘤发生迟15-21天,肿瘤体积较小;4.与阴性对照组相比,感染ID4的HaCaT细胞迁移能力显著降低,增殖能力及凋亡水平无显著差异,处于S期的细胞数量显著减少。结论ID4基因可以不同程度上抑制A431、Colo16、HaCaT细胞增殖、分裂、迁移、侵袭,促进细胞凋亡,并抑制裸鼠体内成瘤。因此,ID4基因可能在CSCC的形成和发展过程中发挥抑癌基因的作用。