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目的:探讨脂肪来源的干细胞(adipose-derived stem cell,ADSC)移植对脑缺血大鼠神经轴突再生影响的机制,通过观察ADSC移植对脑缺血大鼠脑组织中Neurocan(神经蛋白聚糖)、GFAP(神经胶质酸性蛋白)、Neuritin(神经突蛋白)、NF200(神经微丝蛋白200)表达情况,为ADSC移植治疗脑缺血性疾病及其机理提供实验依据。方法:1、体外分离培养ADSC,免疫荧光检测其表面标志。2、实验动物分组:54只清洁SD大鼠随机分为假手术组(Sham组),局灶性脑缺血组(MCAO组)和MCAO +ADSC治疗组(ADSC组)。每组再分7d、14d、28d三个亚组,每个亚组6只。3、参考改良Zea-Longa线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)局灶性脑缺血模型。4、DAPI(4’,6-diamidino-2-phenylindole 2hci)体外标记ADSC。5、ADSC移植:ADSC组于造模成功1d后经侧脑室注射入ADSC(内含1×106细胞数)。6、各组大鼠在移植前后不同时间点进行神经功能mNSS评分。7、取材与检测7.1术后7d、14d、28d大鼠大脑灌注、取材、切片。7.2荧光显微镜观察DAPI标记的ADSC在体内存活情况。7.3 Western blot法检测GFAP、Neurocan、Neuritin、NF-200蛋白表达情况。7.4免疫荧光法观察GFAP、Neurocan、Neuritin、NF-200抗原表达情况。7.5 H-E染色法观察病理结果。8、统计学分析结果:1、ADSC组梗死灶周围的纹状体及额顶皮质下脑组织中可观察到DAPI标记的的阳性细胞。2、ADSC移植后能够减轻大鼠神经功能损害程度。3、H-E染色法结果显示梗死灶神经细胞大片坏死,周边区胶质细胞大量增殖,胶质瘢痕形成。4、Western blot法分析结果显示ADSC组脑缺血周边区组织在各个时间点与MCAO组相比GFAP、Neurocan表达明显减少,Neuritin、NF-200表达明显增高,差别具有统计学意义(P <0.05)。结论:ADSC移植后可引起脑缺血Neuritin、NF-200有效表达,并抑制GFAP阳性细胞、Neurocan表达,促进了神经轴突再生和修复。