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哺乳动物三叶因子广泛存在于粘膜系统并发挥重要功能，能够保护上皮抵抗外来入侵，还能参与粘膜的损伤修复。三叶因子既有报道作为肿瘤抑制因子，又有报道为潜在的肿瘤促进因子。这一矛盾的现象人们无法解释。目前三叶因子研究的主要科学问题是三叶因子的分子机制，尤其是鉴定其受体及弄清它行使功能时所涉及的各级信号通路。Bm-TFF2是我们实验室从大蹼铃蟾(Bombina maxima)皮肤分泌物中分离纯化得到的新型血小板激动蛋白，但是Bm-TFF2诱导血小板聚集时所涉及的受体和下游信号传导通路仍不清楚。
我们构建了原核表达载体，获得了重组的Bm-TFF2，重组Bm-TFF2与天然纯化的Bm-TFF2具有同等的诱导血小板聚集活性。在鉴定Bm-TFF2诱导血小板聚集的受体和信号传导通路过程中，我们首先通过亲和层析的方法，发现并鉴定了prohibitin2(PHB2)，PHB2能够特异性结合Bm-TFF2亲和柱，而在其他对照如Mucetin，stejinulxin，BSA等亲和柱上没有发现。流式和激光共聚焦结果显示PHB2在血小板的质膜上表达。虽然抗体抑制实验表明PHB2确实参与了Bm-TFF2诱导的血小板聚集，但是表面等离子共振实验则显示PHB2不能直接和Bm-TFF2结合，流式检测也发现PHB2的抗体不能抑制Bm-TFF2和血小板的结合。结果表明PHB2作为Bm-TFF2诱导血小板聚集的膜表面辅助因子。
通过比较Bm-TFF2，U46619和Steinulxin引起的血小板活化过程中的酪氨酸磷酸化分子的差异，药理学抑制剂的抑制效果，实验结果首先提示Bm-TFF2的受体可能属于GPCR型受体；我们还发现Bm-TFF2能够自身去敏，而且对老鼠的血小板没有反应，所以认为可能是蛋白酶受体1(PAR1)参与了Bm-TFF2的激动血小板。接下来，使用PAR1的专一性抑制剂以及交叉去敏实验等表明确实是PAR1介导了Bm-TFF2诱导的血小板聚集。我们又在CHO细胞上表达了PAR1，Bm-TFF2能够结合到稳定表达PAR1的CHO细胞上，结果表明PAR1是Bm-TFF2的血小板膜受体。抗PAR1受体N-末端抗体能够抑制凝血酶诱导的血小板聚集，但不能抑制Bm-TFF2诱导的血小板聚集，Cathepsin G酶切实验也证明Bm-TFF2活化血小板不依赖于受体活性末端的释放。结果表明Bm-TFF2激活PAR1的分子机制与蛋白酶不同。
进一步的实验表明在血小板活化过程中PHB2能够发生细胞骨架的转移，并且这一骨架转移依赖于GPⅡbⅢa的活化。另外，PHB2在活化后的细胞骨架分离的脂筏中也存在。考虑到Bm-TFF2对细胞骨架抑制剂和脂筏抑制剂比较敏感，所以我们认为接下来利用Bm-TFF2作为分子探针来研究针对骨架和脂筏上PAR1和PHB2的相互关系及其在血小板生理病理中的机制将有重要意义。