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目的:血管腔内治疗技术以其微创的独特优势成为目前治疗动脉闭塞性疾病的主要治疗方式之一,然而腔内介入治疗术后血管再狭窄是一直不可回避的问题。本课题组拟采用核转染细胞过表达Periostin蛋白和体内细胞移植干预的方式对颈动脉损伤模型小鼠进行治疗并检测评估其效果,致力于寻找更好的腔内介入治疗术后血管再狭窄的治疗方案。 方法:特制高脂饲料喂养ApoE-/-小鼠四个月,在饲养前后对小鼠进行称重和检测血脂水平,处死部分小鼠并进行颈总动脉和肝脏HE染色,观察组织结构的变化。外购稳定过表达Periostin蛋白内皮前体细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)细胞株并进行培养。将过表达Periostin蛋白的EPCs、沉默表达Periostin蛋白的EPCs、正常的EPCs分别经尾静脉注射进小鼠体内。治疗四个月后,通过Evans blue染色检测损伤颈动脉再内皮化情况;HE和红油O染色检测损伤动脉新生内膜增生情况并比较斑块面积大小;免疫组织化学染色法测定细胞核抗原Ki67和PCNA表达,间接检测细胞增殖程度。 结果:高脂饮食组小鼠体重增加;血脂水平明显升高;病理染色提示颈总动脉内膜破坏增厚,大量斑块形成;肝脏结构紊乱,大部分肝细胞肿胀、气球样变,内有空泡形成。以上结果提示ApoE-/-小鼠颈动脉损伤模型建立成功。观察细胞的形态呈铺路石样;免疫组化鉴定细胞CD34表达为阳性;Western-blot实验检测Periostin蛋白在EPCs的稳定表达,可以用于后期颈动脉损伤模型小鼠的体内移植治疗。各病理染色结果表明过表达Periostin蛋白能够促进EPCs在小鼠体内增殖和损伤颈动脉再内皮化,效果明显。 结论:本课题通过高脂饲料喂养ApoE-/-小鼠,能够成功建立颈动脉损伤模型小鼠。通过基因转染的方法构建过表达Periostin蛋白的EPCs,并进行体内移植治疗,研究结果表明过表达Periostin蛋白的EPCs能促进小鼠损伤颈动脉再内皮化,效果优于沉默表达Periostin蛋白的EPCs和单纯EPCs。