【摘 要】
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目的:枸杞子为茄科植物宁夏枸杞Lycium barbarum L.的干燥成熟果实,具有滋补肝肾,益精明目之功效,为药食同源佳品。2015版《中国药典》收载的枸杞子质量标准相对滞后,性状鉴别结合对照药材为参照的薄层色谱（TLC）定性鉴别不能实现其真伪鉴别;以薄层扫描法测定枸杞子中甜菜碱含量项下,供试品溶液制备过程繁琐,环境温度和湿度对其薄层显色效果影响较大,检测方法灵敏度低、重现性和稳定性差,不能实
【基金项目】
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上海市科委创新行动计划（No.17DZ2201800）:药食同源枸杞子质量评价关键技术与质量标准研究
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目的:枸杞子为茄科植物宁夏枸杞Lycium barbarum L.的干燥成熟果实,具有滋补肝肾,益精明目之功效,为药食同源佳品。2015版《中国药典》收载的枸杞子质量标准相对滞后,性状鉴别结合对照药材为参照的薄层色谱（TLC）定性鉴别不能实现其真伪鉴别;以薄层扫描法测定枸杞子中甜菜碱含量项下,供试品溶液制备过程繁琐,环境温度和湿度对其薄层显色效果影响较大,检测方法灵敏度低、重现性和稳定性差,不能实现枸杞子中甜菜碱的准确定量;不同品种枸杞子和不同产地宁夏枸杞中与功效关联的化学成分未见系统地比较研究。因此,本课题采用分析化学和中药化学相结合的研究方法和技术,从定性和定量角度改进现行药典中枸杞子质量标准;采用指纹图谱技术最大化表征不同品种枸杞和不同产地宁夏枸杞中酚类化学成分,探究其共性与差异成分,从而为建立能够有效鉴别枸杞子的科学质量标准提供科学依据。方法:在原有对照药材为参照的TLC定性鉴别基础上,进行供试品溶液制备方法和展开溶剂系统优化,建立了增加以东莨菪素为指标成分的TLC方法;采用固相萃取方法用于甜菜碱的提取,高效液相色谱（HPLC）替代薄层扫描法用于甜菜碱含量测定。以市场主流的四种枸杞子（宁夏枸杞、黄果枸杞、中华枸杞和黑果枸杞）为对象,建立与抗氧化、抗衰老等关联的酚类成分超高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术（UPLC-Q-TOF-MS/MS）指纹图谱,通过主成分分析（PCA）、偏最小二乘法判别分析（PLS-DA）,筛选引起不同品种枸杞和不同产地宁夏枸杞差异的代表性酚类成分,为综合评价枸杞质量提供理论依据。结果:确定水超声1 h,乙酸乙酯萃取作为样品处理方法,修改展开系统为二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（15:2:0.5）,在对照药材的基础上,增加了以东莨菪素为指标成分的TLC定性鉴别方法;碱性氧化铝固相萃取结合HPLC的甜菜碱含量测定结果是现行药典方法的2-3倍。UPLC-Q-TOF-MS/MS指纹图谱比对研究发现不同品种枸杞、不同产地宁夏枸杞酚类成分组成差异明显,共102个色谱峰被检识,88个色谱峰被鉴定,63个酚类化合物主要为苯丙素类、黄酮类、香豆素类化合物,其中成分差异表征主要体现在苯丙素类。结论:本课题在枸杞子现行中国药典标准基础上,建立了更为合理、科学的TLC定性和HPLC定量分析方法,为枸杞子质量的准确控制提供依据。通过不同品种枸杞子及不同产地宁夏枸杞酚类成分UPLC-Q-TOF-MS/MS指纹图谱的比对研究,发现其共性和差异性成分,为建立能够有效鉴别枸杞子真伪、反映内在品质的科学质量标准提供科学依据,也为宁夏枸杞道地药材质量标准的制定奠定基础。
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