【摘 要】
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目的从蛋白质整体水平分析羊种布鲁氏菌强毒株16M和疫苗株M5的差异蛋白,探讨羊种布鲁氏菌强毒株16M和疫苗株M5毒力机制。方法利用丙酮干粉法分别提取布鲁氏菌强毒株16M和疫苗
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目的从蛋白质整体水平分析羊种布鲁氏菌强毒株16M和疫苗株M5的差异蛋白,探讨羊种布鲁氏菌强毒株16M和疫苗株M5毒力机制。方法利用丙酮干粉法分别提取布鲁氏菌强毒株16M和疫苗株M5的菌体全蛋白质,以双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术进行蛋白质分离,考马斯亮蓝染色,扫描获得双向电泳图谱,利用ImageMaster 2D Platinum4.0软件筛选出差异蛋白质,切点,制备质谱样,进行质谱分析,用MALDI-TOF-MS获得肽质量指纹图谱,数据库进行搜索,获得所鉴定蛋白质的生物学信息。结果应用固相pH梯度双向凝胶电泳获得了重复性较好的2-DE凝胶图谱,观察布鲁氏菌强毒株16M和疫苗株M5的2-DE图谱,其蛋白表达模式非常相似,利用ImageMaster 2D Platinum 4.0软件自动识别蛋白点后,布鲁氏菌强毒株16M获得蛋白点856个,疫苗株M5蛋白点793个。从中共筛选出23个差异蛋白点进行质谱鉴定,其中20个蛋白点在数据库中匹配到了有意义的蛋白质。通过质谱鉴定,得到的差异蛋白功能涉及糖的代谢、物质运输、蛋白的合成以及分子伴侣等。其中有13个蛋白在强毒株16M中表达上调,5个蛋白在疫苗株M5中表达上调。
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