【摘 要】
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目的:Micro RNA在肿瘤发生发展的方方面面都起着至关重要的生物学作用。先前大量的研究表明,在众多癌症中其中包括髓母细胞瘤,miR-21的水平都是显著增加的。但是,miR-21在髓母细胞瘤具体的作用机制尚未报道。因此本次研究的目的为了探索miR-21在髓母细胞瘤DAOY细胞的作用及其对相关信号通路的影响。方法:通过脂质体TM2000将miR-21 inhibitor、miR-21 inhibi
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目的:Micro RNA在肿瘤发生发展的方方面面都起着至关重要的生物学作用。先前大量的研究表明,在众多癌症中其中包括髓母细胞瘤,miR-21的水平都是显著增加的。但是,miR-21在髓母细胞瘤具体的作用机制尚未报道。因此本次研究的目的为了探索miR-21在髓母细胞瘤DAOY细胞的作用及其对相关信号通路的影响。方法:通过脂质体TM2000将miR-21 inhibitor、miR-21 inhibitor NC和miR-21 mimic转染至DAOY细胞。48h后,应用q RT-PCR法评估miR-21的表达效果;联合应用CCK8法和平板细胞克隆形成实验,相互验证并检测不同转染组的细胞增殖情况;应用Annexin V-FITC法检测不同转染组的细胞坏死和凋亡情况;联合应用Transwell实验和细胞划痕实验,相互验证并检测不同转染组的细胞侵袭能力和细胞迁移能力。同时应用Western blot检测不同转染组的PTEN/PI3K/AKT的激活情况,并观察miR-21对PI3K/AKT信号通路的影响。结果:与inhibitor NC组相比,miR-21 mimic转染后的DAOY细胞的增殖、细胞迁移率和侵袭力增加,而凋亡则明显减少。而miR-21 inhibitor转染后的DAOY细胞的增殖、迁移率和侵袭力明显降低,而凋亡则明显增加。在miR-21 mimic转染后的DAOY细胞中,PI3K、AKT表达水平显著增加,而PTEN、Caspase-3和Caspase-9蛋白质的水平显著下降。同时,在miR-21 inhibitor转染后的DAOY细胞中,PI3K、AKT表达水平下降,PTEN、Caspase-3和Caspase-9蛋白质的水平则明显上升。结论:1.在髓母细胞瘤中呈高表达的miR-21,能够促进其增殖、迁移和侵袭,抑制其坏死和凋亡。2.在髓母细胞瘤中miR-21通过调控PI3K/AKT信号通路的表达,促进其增殖、迁移和侵袭,抑制其坏死和凋亡。
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