日本血吸虫卵黄铁蛋白基因重组及其DNA免疫研究

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该课题的研究,通过对日本血吸虫卵黄铁蛋白基因(Sj YolFer)体外扩增,利用RNA斑点杂交探讨其转录差异,同时用逆转录病毒作载体,构建真核表达重组质粒,研究该基因在哺乳动物细胞中的表在状况及抗原性;最后运用DNA免疫技术观察其免疫小鼠的免疫反应和抗攻击感染的保护效果,为进一步深入研究奠定基础。结论:该研究经体外扩增获得日本血吸虫卵黄铁蛋白基因的cDNA和DNA片段。RNA斑点杂交结果显示,Sj YolFer在雌虫的转录丰度明显高于雄虫。分别构建重组逆转录病毒质粒pLYolFer和pLYolFerD,并将它们转染Hela细胞,建立稳定表在Sj YolFer的细胞克隆,表达蛋白分子量约22KDa,该蛋白条带具有抗原性,为质粒DNA免疫奠定了基础。
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