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目的:以原发性肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）患者和健康人群的经络穴位温度、临床生化指标和肠道微菌群作为研究对象,旨在发现HCC患者经络穴位温度特征和经络穴位温度失衡与临床生化指标及肠道菌群间的相关性。方法:纳入23名首诊被考虑为HCC的患者作为病例组和21名健康人作为正常组对照组,分别收集其基本生理状况信息、14条经络126个穴位的温度、静脉血液样本及粪便样本,血液样本及粪便样本送检后得到的数据与穴位温度一同使用SPSS23.0进行统计学分析。结果:（1）病例组12正经、督脉与任脉穴位平均温度高于正常组,仅督脉的穴位平均温度（36.62±0.63℃）差别具有显著性（正常组督脉穴位平均温度:36.26±0.27℃,p＜0.05）;（2）病例组与正常组的经络穴位温度均具有同心圆趋势分布的特征,病例组经络穴位温度的波动幅度更大;正常组与病例组的12正经穴位温度呈左右对称趋势,但病例组12正经的穴位温度的左右对称性较正常组下降;病例组头部（36.66±0.08℃）、胸部（36.62±0.06℃）、手臂（36.36±0.27℃）、腹部（36.53±0.37℃）和下肢（35.99±0.17℃）的穴位平均温度显著高于正常组（p＜0.05）;（3）病例组的大肠经（0.17±0.20℃）、胃经（0.17±0.20℃）、脾经（0.39±0.47℃）、心经（0.28±0.34℃）、小肠经（0.30±0.37℃）、肾经（0.30±0.56℃）、心包经（0.25±0.31℃）、三焦经（0.29±0.45℃）、胆经（0.19±0.21℃）和肝经（0.28±0.29℃）穴位平均温差显著大于正常组（p＜0.05）;（4）病例组温度失衡的穴位平均数量及占比均显著高于正常组（p＜0.05）;病例组的经络原穴LI4（0.27±0.26℃）、PC7（0.13±0.13℃）、GB40（0.26±0.31℃）和LR3（0.33±0.46℃）的温差显著大于正常组（p＜0.05）,且心包经、胆经和肝经中温度失衡发生频率在50%以上的五输穴数量高于其他经络;（5）病例组的球蛋白、ALT、AST、胆碱酯酶、AFP的水平及红细胞、中性粒细胞绝对值均显著高于正常组,而前白蛋白水平和淋巴细胞绝对值在病例组中显著低于正常组;球蛋白水平与大肠经、脾经、肾经、心包经和肝经温度失衡呈正相关关系（r＞0）;甲胎蛋白水平与脾经、肾经、心包经、三焦经及肝经温度失衡正相关关系（r＞0）;红细胞绝对值与脾经、小肠经、心包经和肝经温度失衡的线性呈正相关关系（r＞0）;中性粒细胞计数与三焦经失衡呈正相关关系（r＞0）;（6）病例组与正常组的菌群多样性无显著差异;在门水平上,病例组中厚壁菌门的相对丰度较正常组显著降低,拟杆菌门的相对丰度较正常组显著升高;在科水平上,病例组的Clostridiales bacterium-CCNA10、Butyrate producing bacterium-SS34、Acidaminococcaceae和Campylobacteraceae的相对丰度均显著低于正常组,但相对丰度的改变与经络穴位温度的失衡无显著相关性;在属水平上,病例组拟杆菌属相对丰度明显高于对照组,而Clostridiaceae bacterium Marseille Q4143、Lachnospiraceae bacterium、Lachnospiraceae bacterium＿choco86、Eubacterium＿rectale、Phascolarctobacterium、Dialister和Megasphaera的相对丰度则明显低于对照组;Dialister与三焦经、心包经、肝经和胆经穴位温度失衡呈显著负相关（r＜0）;Clostridiaceae bacterium Marseille Q4143与三焦经、心包经和心经穴位温度失衡呈显著负相关（r＜0）。结论:（1）HCC患者与正常人的经络穴位温度均具有同心圆趋势分布的特征,但温度波动幅度更大;HCC患者12正经的穴位温度的左右对称性较正常人下降,双侧同名经络穴位温差增大;且双侧同名穴位出现失衡的频率较正常人升高,双侧原穴及五输穴的温差也呈增大趋势,原穴以大肠经合谷、心包经大陵、胆经丘墟和肝经太冲的温差较正常人有显著差异;心包经、胆经和肝经中大部分五输穴的温差较正常人显著增大;心包经、胆经和肝经穴位的温度失衡可能是HCC患者穴位温度失衡的特征。（2）球蛋白水平、甲胎蛋白水平及中性粒细胞绝对值的上升与大肠经、脾经、肾经、心包经、三焦经、胆经及肝经温度失衡有显著正相关关系,经络温度失衡与生化指标变化之间的机制有待进一步探究。（3）在属水平上,HCC患者肠道菌群Dialister与Clostridiaceae bacterium Marseille Q4143的相对丰度显著降低;小杆菌属Dialister相对丰度降低与心经、三焦经、胆经及肝经的温度失衡成负相关,Clostridiaceae bacterium Marseille Q4143的相对丰度降低与三焦经、心经以及心包经的失衡成负相关。肠道菌群的丰度变化与经络温度失衡之间是否存在机制性关联有待进一步探究。