一种肝原代细胞培养的3D生物打印材料研究

来源 :大连理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hebeikbyz
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近年来,3D生物打印技术发展迅速,已经成为组织工程及生物医学重要研究领域。生物墨水作为一种典型软物质材料,直接关系到最终成型效果和打印期望的精度及生物相容性。脱细胞基质(DECM),来源于天然组织中,由于具备原有肝脏组织中主要的生物学特性,故具有良好的生物相容性、可降解性和诱导血管生成,以及组织再生的能力,成为生物墨水的优选材料。当前研究发现脱细胞基质的可打印性能不佳,只能作为生物墨水的添加剂,导致打印体中合适的天然生长因子及活性生物成分的含量受限,影响正常细胞的活性。基于上述背景,本文研究一种新型的生物打印复合材料,其主要成分包括纳米粘土(Nanoclay)、大鼠肝脏脱细胞基质(DECM)以及甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA),其中肝脏脱细胞基质是由大鼠肝脏组织经过曲拉通(Triton X-100)与十二烷基硫酸钠(SDS)联合灌注得到,富含胶原蛋白、糖胺聚糖、生长因子bFGF、HGF等多种重要成分。实验结果表明,由于纳米粘土的加入,不仅生物墨水的储能模量得到改善,具有优异的流变学性能而且打印的3D支架结构清晰,具有较好的打印性能,提升大鼠肝脏脱细胞基质的含量至75%,是目前已报导文献中含量最高的。利用该复合材料打印了3D细胞支架,发现在支架表面生长的肝原代细胞具有较好的生长活性和白蛋白表达,具体表现为在培养第一天时,肝原代细胞的白蛋白分泌含量为9.35g/L,显著高于其他组分的生物墨水分泌含量(P<0.01),表明该墨水具有良好的生物相容性,可有效提高肝原代细胞的存活和增殖,并具有较低的细胞毒性。
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