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1-脱氧野尻霉素(DNJ)是桑叶中的一种哌啶生物碱,其化学名称是3,4,5-三羟基- 2-羟甲基四氢吡啶,分子式为C6H13NO4,分子量为163。DNJ作为α-葡萄糖苷酶的抑制剂,具有降血糖、抗病毒、抗肿瘤转移等作用。另外,DNJ还是α-葡萄糖淀粉酶的有效抑止剂。本试验利用化学合成法将DNJ转化成沸点较低的酯类物质,通过气相色谱法测定桑叶中1-脱氧野尻霉素(DNJ)的含量,并比较了陕西省蚕桑丝绸研究所培育的15个桑叶品种间(秋季采摘)DNJ含量的高低。结果表明,用气相色谱法测定桑叶中的DNJ含量是可取的,不同品种的桑叶样品中DNJ的含量有一定差别。本实验考察了溶剂对桑叶中DNJ提取的影响,选用无水乙醇、丙酮、氯仿、吡啶等不同试剂对DNJ进行提取。最终确定吡啶为气相色谱法测定DNJ的提取剂。同时考察了衍生化条件对该试验的影响,考察内容包括衍生化试剂、衍生化时间、衍生化温度等内容。最终确定在水浴60℃条件下以N,0-双(三甲基硅烷基)乙酰胺(BSA)作为衍生化试剂进行衍生化反应5min。本试验还考察了不同色谱条件对DNJ测定的影响,考察内容包括色谱柱选择、柱温、载气流量进样方式等。最终确定色谱条件为:色谱柱OV-275,初温130℃×3 min,以30℃/min上升至170℃,维持4min;汽化室温度200℃;检测口温度180℃;载气为N2,流速40 mL/min;进样量1 uL,火焰离子检测器(FID),色谱分析软件采用千谱软件公司HW色谱工作站。本试验采用标准曲线法计算DNJ含量,该法具有简化重复操作,避免系统误差等优点。试验及计算后得到标准曲线方程Y=18362.45C-5.22,r=0.987,最低检测浓度为0.12μg/mL。加样回收率试验结果RSD=0.99%(n=5)。重复性试验结果RSD=1.32%(n=5)。稳定性试验结果表明:标样及样品在8h内基本稳定,RSD分别为0.87%和1.03%(n=5)。本试验考察了用气相色谱法测定陕西省蚕桑丝绸研究所培育的15个品种桑叶中DNJ含量。在这15个品种中含量最高的为0.198%,含量最低的为0.105%,15个品种中DNJ平均含量为0.159%。通过测定比较,得出结论是15号品种含DNJ量最高,即具有较高的降血糖药用价值。