【摘 要】
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目的:观察成骨细胞不同生长阶段caveolin-1表达的时程变化,并研究caveolin-1对成骨细胞MC3T3-E1增殖和分化功能的影响。方法:MC3T3-E1细胞在含β-甘油磷酸钠,抗坏血酸的培养
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目的:观察成骨细胞不同生长阶段caveolin-1表达的时程变化,并研究caveolin-1对成骨细胞MC3T3-E1增殖和分化功能的影响。方法:MC3T3-E1细胞在含β-甘油磷酸钠,抗坏血酸的培养基中培养18d,在细胞培养的不同时间(3,6,9,12,15,18 d) ,采用western blotting方法观察caveolin-1蛋白表达变化。采用经western blotting法筛选并确证有效的RNA干扰质粒pGenesil-1.1- cav-1质粒下调caveolin-1表达后,观察其对成骨细胞MC3T3-E1增殖和分化作用的影响:转染后第3天测定细胞存活率(MTT法),分别在转染后第3,6,9,12,15d测定细胞裂解液ALP活性(PNPP法)、培养上清骨钙素浓度(ELISA)。结果:caveolin-1蛋白随MC3T3-E1细胞的分化,表达量逐渐降低(P < 0. 01)各处理组对增殖期MC3T3-E1细胞存活率无明显影响(P > 0. 05)。转染RNA干扰质粒pGenesil-1.1- cav-1组,ALP活性和骨钙素浓度与对照组相比峰值明显增大,且峰值前移。结论:caveolin-1对成骨细胞MC3T3-E1分化具有负性调节作用,不影响增殖。
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