目的 腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)作为治疗肾功能衰竭,特别是慢性肾功能衰竭的重要手段,其原理是利用腹膜这一半透膜作为滤过膜,通过腹膜毛细血管内血液和腹腔内透析液进行水和溶质的交换,达到清除多余水分和代谢废物的目的。但是长期使用高渗葡萄糖透析液透析,肾衰患者极易发生腹膜感染,导致腹膜透析超滤衰竭的发生,这是使患者退出腹透的主要原因。 腹膜透析超滤衰竭(ultrafiltration failure,UF)分为四型,其中Ⅰ型为透析液内葡萄糖快速吸收,因而腹膜内有效渗透压梯度维持时间短,超滤效能降低。Ⅰ型腹膜超滤衰竭产生的机制比较复杂,目前研究认为与高糖透析液的长期应用和腹膜炎的发生有关。研究提示,腹膜炎可以诱导炎症细胞释放多种炎症介质和细胞因子,导致腹膜间皮细胞下基质重构和毛细血管增生,加速小分子溶质包括葡萄糖的转运,使腹膜对水的清除率下降,表现为超滤衰竭。本实验试图研究在细胞水平上,腹膜炎导致超滤衰竭的发生机理。 据报道,在体外培养的人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelium cells,HPMCs)上有三种葡萄糖转运蛋白(glucose transporter,GLUT),其中葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)是介导HPMCs葡萄糖摄取的主要转运蛋白,其表达上调,将增加HPMCs对葡萄糖的摄取,降低超滤率。腹膜炎时,GLUT1的表达变化如何,目前尚未见报道。本实验通过研究脂多糖(LPS)对HPMCs GLUT1表达的影响,来揭示超滤衰竭产生的机理。 方法 1.胰蛋白酶消化法进行HPMCs的原代培养及传代;