红颈常室茧蜂卵巢发育及其生殖相关蛋白研究

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红颈常室茧蜂是一种盲蝽若虫优势内寄生蜂。目前对该蜂是生殖生理研究较少,本文对红颈常室茧蜂蛹期的发育形态学及卵巢发育进行了研究,同时对不同温度饲养条件下不同日龄的雌蜂的生殖系统,卵巢的结构和卵子发生的状况进行了研究比较;并且利用电子显微镜对卵巢及卵子超微结构的进行研究和观察了该蜂生殖系统内各器官的形态、构造及与功能的关系。通过蛋白电泳的分析及蛋白质组学对红颈常室茧蜂卵巢蛋白进行蛋白质鉴定、蛋白基因产物的分类状况及生物学功能研究。本研究获得的主要结果如下:1、利用光学显微镜对红颈常室茧蜂蛹发育进度研究发现:该蜂是一种卵育型寄生蜂,雌虫在未羽化前4d卵巢就已经开始发育,并且羽化后期卵巢管内已有少量的成熟卵粒。蛹后期(10-14d)可以通过幼虫体表颜色的变化或腹部末端的形状区分雌雄。2、该蜂85%卵巢是由6-8对卵巢管组成(N>100)。23℃和15℃条件下卵巢中成熟的卵子数随日龄的增加而不断增加,且23 ℃条件下卵巢中平均每根卵巢管的卵子总数高于15 ℃条件下的。雌蜂在羽化前期(1 - 3 d)解剖时时卵巢内的成熟的卵粒数量较少,卵巢管内含有大量的卵原细胞,卵子内充满了大量的脂滴,中后期(5-11d)随着脂肪体的降解吸收,卵子内逐渐新生一些细胞器线粒体、高尔基体等。这些细胞器的数量开始逐渐增多,活力增强。卵子内存在大量的滋养细胞,其中滋养细胞为卵母细胞发育供给必要的营养元素。从超微结构图中可以看出在整个卵巢发育的过程中,没有发现卵黄原蛋白颗粒的产生及运输过程。3、根据红颈常室茧蜂卵巢蛋白电泳的分析得出红颈常室茧蜂成虫约有20条蛋白条带位于15 - 260 KD之间,卵巢的蛋白条带要少成虫的主要集中在25 KD-120 KD之间,通过进行蛋白质谱分别鉴定出1382个蛋白,除去冗余蛋白总共鉴定了 1190个非冗余蛋白,在80 KD胶条处鉴定出一段卵黄原蛋白多肽片段。对该蜂的卵巢表达蛋白进行生物信息学分析,明确了红颈常室茧蜂卵细胞形成相关的功能蛋白与生物学路径。生物学路径分析发现细胞组成cell part、代谢过程metabolic process、催化功能catalytic activity蛋白在卵巢中较为丰富。通过KEGG pathway在卵巢中分析发现遗在传信息处理中参与转录Transcription的蛋白最多。
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