脑瘤的发病群体十分年轻化,恶性脑瘤主要是胶质瘤。胶质瘤可分为Ⅰ～Ⅳ四个级别,其中级别Ⅳ最难治愈,胶质母细胞瘤被划分为Ⅳ级,细胞多处于未分化状态,患者预后差,中位生存期很难达到一年半,且治疗后难逃复发的命运。虽然目前针对癌症已开发出多种新型治疗手段,如免疫治疗、纳米传递技术等,但由于胶质瘤所处位置特殊,以及血脑屏障（Blood-Brain Barrier,BBB）的存在限制了许多疗法的使用。肿瘤干细胞是肿瘤中一类特殊的群体,在肿瘤的出现、抵抗治疗、复发等方面起到了重要作用,表现出干细胞相似的特征,目前已在胶质瘤、乳腺癌、肝癌等肿瘤中分离出了这类细胞。因此,根据CSC的特征进行针对CSC的定向治疗有望减缓肿瘤的恶性进展速度、提高患者的预后。本研究采用纤维蛋白原和凝血酶构建了三维软纤维蛋白凝胶体系,并利用此体系从胶质母细胞瘤（Glioblastoma,GBM）细胞系DBTRG-05 MG中富集筛选到胶质瘤干细胞（Glioma Stem Cell,GSC）,并对富集得到细胞的干性能力进行了验证。转录组测序技术被用在探究GSC相较于GBM细胞的区别中,生信分析之后在GSC和GBM细胞差异表达的基因中选择斯钙素-1（Stanniocalcin 1,STC1）作为目标基因进行深入研究。我们得到了如下结果:1.三维软纤维蛋白凝胶体系富集得到的细胞具有更强的干细胞特性,例如高表达GSC标志物、对替莫唑胺（Temozolomide,TMZ）的耐受程度更强、在体内有很强的致瘤能力。2.从转录水平上分析了GSC和普通胶质瘤细胞的表达情况,并对显著性差异表达基因进行GO和KEGG的富集分析,得到了一些可能在GSC中起重要作用的通路。3.STC1在GBM样本中高表达,且STC1在GSC中表达量高于普通胶质瘤细胞。4.过表达STC1可以增加胶质瘤细胞系DBTRG-05 MG、U-87 MG、U251的部分GSC标志物的表达情况、增加成球能力和对TMZ的抵抗能力,但在对胶质瘤细胞系增殖能力方面的效果略有不同。STC1的敲低处理会减少胶质瘤细胞系DBTRG-05 MG、U-87 MG部分GSC标志物的表达情况,增加对TMZ的敏感性。5.过表达STC1能够提高MTMG的表达量,并且可能是STC1促进胶质瘤对TMZ耐受的机制之一。我们的研究表明三维软纤维蛋白凝胶培养能够富集GSC,RNA-Seq的结果揭示了可能在GSC中起重要作用的分子及通路。我们的实验也证明了STC1可以促进胶质瘤细胞的干性特征,并在抵抗TMZ方面起到十分重要的作用,但关于STC1增强胶质瘤细胞对TMZ治疗抵抗的具体机制还需要进一步的探索。