【摘 要】
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目的:观察益气养阴活血利水法代表方心阴片对慢性心力衰竭的干预作用,并探讨心阴片对心力衰竭的作用是否通过PGC-1α途径介导的线粒体能量代谢调控机制。方法:60只SPF级C57BL/6J雄性小鼠适应性喂养一周后,随机分为5组,包括假手术组、模型组、心阴片低剂量组、心阴片高剂量组和曲美他嗪组,行主动脉弓缩窄术构建心力衰竭动物模型。小鼠术后情况稳定后开始给药干预,连续灌胃8周时间后用小动物超声仪检测小鼠
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目的:观察益气养阴活血利水法代表方心阴片对慢性心力衰竭的干预作用,并探讨心阴片对心力衰竭的作用是否通过PGC-1α途径介导的线粒体能量代谢调控机制。方法:60只SPF级C57BL/6J雄性小鼠适应性喂养一周后,随机分为5组,包括假手术组、模型组、心阴片低剂量组、心阴片高剂量组和曲美他嗪组,行主动脉弓缩窄术构建心力衰竭动物模型。小鼠术后情况稳定后开始给药干预,连续灌胃8周时间后用小动物超声仪检测小鼠心功能,HE染色和Masson染色法检测心脏组织形态学变化,实时荧光定量PCR技术检测心脏ANP、BNP的m RNA表达水平,透射电镜观察心脏线粒体超微结构,ATP检测试剂盒检测心脏ATP水平,实时荧光定量PCR检测PGC-1α、NRF1、NRF2的m RNA表达,免疫印迹法检测PGC-1α、NRF1、TFAM、TFB2M蛋白表达。结果:（1）主动脉弓缩窄术后药物干预8周再检测小鼠心功能,结果显示:与假手术组相比,模型组的LVEF、LVFS显著下降（P<0.05）,LVIDd,LVIDs及LV Mass显著增大（P<0.05）;与模型组相比,心阴片低、高剂量组明显提高LVEF、LVFS（P<0.05）,明显降低LVIDs、LV Mass（P<0.05）,心阴片高剂量组改善LVIDd作用更明显（P<0.05）;与模型组相比,曲美他嗪组LVEF、LVFS、LVIDd、LVIDs和LV Mass均见明显改善（P<0.05）。（2）HE和Masson染色结果显示:低、高剂量的心阴片和曲美他嗪均能够改善心肌细胞排列,减轻间质炎性细胞浸润,降低心肌胶原纤维沉积。（3）实时荧光定量PCR检测心脏ANP、BNP的m RNA表达水平,结果显示:与假手术组相比,模型组ANP、BNP水平显著升高（P<0.05）;与模型组相比,低、高剂量心阴片和曲美他嗪均能够明显降低ANP、BNP水平（P<0.05）,其中以高剂量心阴片改善效果最佳。（4）透射电镜下观察心肌线粒体超微结构,结果显示:模型组心肌线粒体超微结构破坏严重,线粒体排列紊乱无序,数量明显减少,体积明显肥大肿胀,外膜破裂不完整,嵴形态模糊、密度下降,有空泡现象;低、高剂量的心阴片和曲美他嗪均能改善心脏线粒体超微结构,减轻线粒体肿胀,外膜更完整清晰,提高嵴密度。（5）检测心脏ATP水平,结果显示:与假手术组相比,模型组小鼠心脏ATP水平显著下降（P<0.05）,心阴片和曲美他嗪均能够明显提高衰竭心脏ATP水平（P<0.05）,改善心脏能量供应。（6）实时荧光定量PCR检测心脏PGC-1α、NRF1、NRF2转录水平表达,结果显示:与假手术组相比,模型组小鼠心脏PGC-1α、NRF1、NRF2表达水平显著下调（P<0.05）;与模型组相比,心阴片给药组和曲美他嗪组能够显著提高心脏PGC-1α、NRF1和NRF2表达（P<0.05）。（7）免疫印迹法检测心脏PGC-1α、NRF1、TFAM和TFB2M蛋白表达,结果显示:与假手术组相比,模型组小鼠心脏PGC-1α、NRF1、TFAM和TFB2M蛋白表达均有显著下调（P<0.05）;与模型组相比,低、高剂量心阴片明显上调PGC-1α蛋白、TFAM蛋白和TFB2M蛋白表达（P<0.05）,高剂量心阴片显著上调NRF1蛋白表达（P<0.05）,而曲美他嗪对NRF1、TFB2M蛋白表达有显著上调作用（P<0.05）。结论:心阴片可改善慢性心力衰竭小鼠的心功能,减轻心脏肥厚和胶原纤维沉积,改善神经内分泌系统环境,降低心脏ANP和BNP水平,改善心脏线粒体结构和功能,其机制可能通过调控PGC-1α联级信号通路,改善线粒体能量代谢实现。
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