GFP转基因小鼠神经干细胞移植治疗大鼠癫痫的实验研究

来源 :昆明医学院 昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jf_long
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目的:通过观察绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)转基因小鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)移植至青霉素致痫鼠海马内的存活、迁移及其对癫痫引起的细胞凋亡的作用,为干细胞移植治疗癫痫提供理论依据。方法:腹腔注射青霉素建立大鼠癫痫模型。64只健康Sprague-Dawley大鼠随机分为正常对照组(n=8),癫痫未移植组(n=8),生理盐水移植组(n=24),神经干细胞移植组(n=24)。分离、培养绿色荧光蛋白转基因小鼠神经干细胞,移植至青霉素诱发癫痫鼠的右侧海马CA1区内,分别于移植后7d、14d、28d灌注取材,应用荧光显微镜观察移植细胞的存活和迁移情况,免疫组化染色方法检测海马区Bcl-2,Bax蛋白的表达,并用动态脑电图机记录移植后7d、14d、28d每组的脑电变化。结果:移植的神经干细胞可以在致痫大鼠海马内存活和迁移,能与周围组织整合,未见细胞过度增生及胶质瘢痕生成,但随着移植时间的延长,细胞存活数逐渐减少,表现为在移植后14d细胞存活数少于7d(P<0.01),28d少于14d(P<0.01)。神经干细胞移植组海马内的凋亡数各时间点均少于生理盐水移植组(P<0.01),同时也发现神经干细胞移植后致痫鼠海马内凋亡细胞数28d组少于14d组(P<0.01),14d组少于7d组(P<0.01),与对照组相比,随着移植时间的延长,神经干细胞移植组脑电中的痫性放电逐渐减少,波幅逐渐降低。结论:神经干细胞移植于青霉素诱发的癫痫鼠脑内能够存活、迁移,能够改善癫痫鼠的脑电生理功能,其具体作用机制可能与其抑制癫痫引起的神经元凋亡有关,提示干细胞移植可能成为一种有效的癫痫治疗手段。
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