目的:胶质瘤是成人中枢神经系统中最常见的原发性肿瘤。由于其呈浸润性生长,肿瘤组织与正常脑组织间无明显边界,很难做到全部切除,术后容易复发;于此同时,胶质瘤对放疗和化疗的敏感性较低。这导致目前对胶质瘤缺乏有效的应对措施。而作为胶质瘤中恶性程度最高的胶质母细胞瘤,其中位生存期更短,研究表明其中位生存期仅为12-15个月,而且如果不能及时救治,其中位生存期可急剧缩短为3个月左右。因此,在传统的手术切除肿瘤的同时再寻找其他新的治疗方法就变的极为迫切,这有可能对其治疗成功产生强有力的推动。当前,分子靶向治疗发展迅速,相关的临床试验成果已表明其可能是极具前景的肿瘤治疗新途径。环状RNA的发现为我们理解肿瘤的发病机制提供了新的视野。环状RNA是指首尾相连以环状形式存在的RNA分子,由于其没有游离的5’和3’端,较其他种类的RNA更加稳定,同时又具有高度的保守性,这意味着它们可能在调节细胞命运方面发挥有效作用。且更为重要的是环状RNA在多种肿瘤细胞中表达异常,这就提示我们环状RNAs可能与肿瘤的发生发展有着紧密的联系。环状RNA CDR1as的表达呈现高度的组织特异性,其在哺乳动物脑中特别丰富而在其他组织中表达很低或者不存在。研究证实CDR1as通过充当mi RNA的“海绵”,在小鼠的脑发育过程中发挥了重要的调控作用。但到目前为止,CDR1as对中枢神经系统（CNS）最常见的原发肿瘤-胶质瘤,尤其是胶质母细胞瘤的影响尚不清楚。因此,本研究将通过分析CDR1as的表达与患者预后的关系、并观察其对肿瘤生长的影响来探寻其对胶质母细胞瘤生长的作用,并对其中的分子机制进行初步探索。方法:1.首先对来自CGGA和TCGA的胶质瘤患者的最大且公共可用的RNA-seq数据库进行了深入分析,以评估胶质瘤组织中CDR1as的表达与患者预后的关系。2.利用RT-q PCR实验对胶质瘤与瘤旁组织以及不同胶质瘤细胞系中CDR1as的表达水平进行检测。然后基于克隆形成,细胞周期,细胞凋亡和增殖的分析以及异种移植的小鼠模型观察CDR1as对胶质瘤生长的影响。3.通过敲低或过表达CDR1as来研究CDR1as对p53及其通路的调节作用;利用荧光素酶报告基因实验来研究CDR1as是否能够促进p53的转录活性。4.通过蛋白稳定性和泛素化实验探讨CDR1as是否通过抑制p53的泛素化来稳定p53的蛋白水平。5.通过Co-IP,RIP及RNA-Pulldown实验,进一步明确CDR1as对p53的调控作用,阐明CDR1as与p53蛋白结合调节p53蛋白稳定性的分子机制。结果:1.数据库数据分析发现CDR1as的表达与胶质瘤分级呈现明显的负相关,CDR1as含量与患者预后则呈现正相关;与正常脑组织相比,CDR1as在胶质瘤中的表达显著下调。2.细胞系分析发现U87MG细胞中CDR1as的相对表达量最高,而在LN229细胞中CDR1as的相对表达量最低。3.分别在CDR1as表达最高的U87MG细胞系中敲低CDR1as,而在CDR1as表达最低的LN229细胞系中过表达CDR1as,发现CDR1as在体外和体内对胶质母细胞瘤的生长都具有强大的抑制作用,而沉默CDR1as能够明显促进胶质瘤形成。4.在U87MG细胞中过表达CDR1as 48h后,加入蛋白合成抑制剂CHX按梯度处理不同的时间,发现p53蛋白降解速率明显降低,而用si沉默CDR1as 48h后同样用CHX处理不同时间,发现与对照组相比p53蛋白的降解速率又显著上升,说明CDR1as提高了p53蛋白的稳定性;而随后的泛素化实验又进一步证明CDR1as能够通过抑制p53的泛素化降解,从而促进了p53的稳定。5.RIP实验和RNA Pull-down实验发现p53与CDR1as能发生相互结合,Co-IP实验则显示CDR1as能阻止p53与MDM2形成复合物,这提示CDR1as可能通过与p53的结合阻止了p53与其负性调控蛋白MDM2的结合,从而抑制了MDM2对p53的泛素化修饰。结论:本研究发现CDR1as在胶质瘤细胞中的含量显著下降,且其与患者预后呈现明显的正相关。CDR1as可能通过与p53结合从而阻止了其与泛素化酶MDM2形成复合物,从而稳定了p53蛋白并抑制肿瘤生长。因此CDR1as的下调可能是促进胶质母细胞瘤生长的重要原因。