欧洲缬草不定根培养体系的初步建立

来源 :延边大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zzc2001
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欧洲缴草(Valeriana oficinalis L.s.l.)以根及根茎入药,具有镇静安神、解挛止痛、抗抑郁和抗肿瘤、抗心律失常和胃肠平滑肌解痉等药理活性,近年来,随着人们生活节奏的加快,生活压力的增大,失眠、抑郁症和肿瘤等疾病越来越多,对缬草提取物及其制剂的需求日益增加。但是野生缬草资源急剧下降,自然生长和人工栽培的缬草,根系生长缓慢,而活性成分主要存在于缬草的根系中。因此,利用组织培养技术大量繁殖欧洲缬草不定根,以其不定根作为药材原材料是解决缬草提取物及其制剂供应不足问题的有效手段。本研究以欧洲缬草种子为材料培养无菌苗,以无菌苗的茎、叶为外植体诱导不定根,经继代和增殖后选择粗细均匀的不定根探讨生长素、培养基种类、pH、碳源种类、糖浓度、盐浓度、总N浓度和总P浓度等因素对不定根悬浮培养的影响,得到不定根悬浮培养的优化条件,初步建立不定根高效培养的体系,考察此体系下不定根的生长状况以及缬草三酯、乙酰缬草三酯和缬草烯酸的含量,为进一步利用生物反应器获得有效成分高产的欧洲缬草不定根系奠定基础。研究结果表明:1、在不同消毒剂和消毒时间组合处理中,用4%的NaClO溶液浸10 min,种子无污染,发芽率最高达76%。2、欧洲缬草不定根诱导的理想条件是:外植体为茎段,培养基MS+0.5 mg·L-1 NAA。3、欧洲缬草不定根悬浮培养的理想条件是:2倍大量元素、48.46 mmol·L-1总N浓度、1.5mmo·L-1总P浓度的RCM培养基,添加蔗糖40g·L-1,NAA0.5 mg·L-1,pH=5.7,第28d宜收获或继代培养。4、理想体系下培养的正常不定根中3种有效成分的含量较高,缬草三酯为7.222mg·g-1,缬草烯酸为4.016mg·g-1,乙酰缬草三酯为0.355 mg·g-1,缬草烯酸的含量高于二年生栽培根。
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