研究背景:结核病是由结核分枝杆菌感染引起的慢性传染病,结核病目前仍是困扰很多发展中国家的公共健康问题,根据世界卫生组织报道(WHO)2016年调查报告显示,全球有1040万人患有结核病,180万人因该病死亡,超过95%的结核病死亡人数发生在低收入和中等收入国家,中国每年估计约有100万例结核病,仅次于印度和印度尼西亚,排名世界第三。因此,开展结核分枝杆菌致病以及免疫逃逸机制的研究具有十分重要的意义。Epstein-Barr virus induced 3(EBI3),是调节性细胞因子 IL-35 和 IL-27 的一个共同亚基,目前临床报道显示结核病人血清中有高水平的EBI3,本研究旨在探讨EBI3在结核分枝杆菌诱导宿主细胞免疫逃逸中的作用。目的:比较毒性结核分枝杆菌(M.tb H37Rv)与卡介苗(BCG)诱导小鼠巨噬细胞合成EBI3的差异,初步探讨EBI3抑制巨噬细胞凋亡的机制,以帮助阐明毒性结核分枝杆菌介导的免疫逃逸机制。方法:分别用热灭活的结核分枝杆菌和卡介苗刺激小鼠巨噬细胞系Raw264.7细胞,采用流式细胞技术检测EBI3的总合成量以及ELISA检测分泌到细胞外的EBI3的含量;免疫荧光技术检测EBI3在细胞内的定位,构建EBI3的shRNA干扰质粒,然后转染Raw264.7细胞检测M.tb H37Rv/BCG刺激的sh-EBI3干扰细胞的凋亡/坏死情况。结果:与BCG对照组相比,灭活M.tb H37Rv刺激Raw264.7细胞产生更高水平的EBI3,免疫荧光技术显示EBI3主要存在于细胞核内,经过M.tb H37Rv刺激后往细胞质释放,通过shRNA干扰Raw264.7细胞EBI3的表达,EBI3的下调表达能促进M..tb H37Rv诱导的巨噬细胞的凋亡。结论:灭活M.tb H37Rv刺激小鼠巨噬细胞系后,引起细胞内EBI3表达升高,升高的EBI3抑制M.tb H37Rv诱导的细胞凋亡;将EBI3干扰下调表达后,促进细胞的凋亡,这有助于阐明毒性结核菌感染细胞后诱导的免疫逃逸机制。