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目的:铅(lead,Pb)是一种常见的环境和职业重金属毒物,大量的研究已证实铅毒性可涉及到人体全身多系统,对人类健康构成持续性的威胁。事实证明铅被人体吸收后,主要以不溶的磷酸铅形式沉积在骨骼系统中,当骨铅含量达到饱和时,若机体继续与铅接触,则血液和骨骼肌中铅的浓度就会升高,累及肌肉组织。本课题主要研究醋酸铅诱导的小鼠骨骼肌成肌细胞(C2C12细胞)的损伤作用,并从氧化应激及凋亡方面探讨其可能的毒性机制。方法:以不同浓度的醋酸铅与C2C12细胞共培养不同时间,首先研究其对细胞的毒性作用,包括MTT法检测细胞存活率,细胞外LDH释放量测定和细胞内铅的浓度;接着研究铅暴露后细胞的氧化应激损伤,包括细胞内活性氧族(ROS)的含量测定和过氧化氢酶(CAT)活力测定;最后研究细胞的凋亡损伤,包括检测细胞内DNA断裂片段,细胞周期,抗凋亡蛋白(Bcl-2)和促凋亡蛋白(Bax)的表达量及细胞内Caspase-3的酶活力。本实验数据来自至少三次独立实验,所有数据均以平均数±标准差表示,统计学分析方法采用Student’s t检验(*p<0.05;**p<0.01)。结果:(1)C2C12成肌细胞存活率降低,细胞LDH释放量增加,细胞内铅的含量富集。(2)铅增加C2C12成肌细胞内ROS含量,降低CAT酶活力。(3)铅暴露时间为24h时,细胞周期在G2/M期发生阻滞,暴露时间为48 h时,高剂量组200μmol/L出现明显凋亡峰;细胞内核DNA发生断裂出现片段化;抗凋亡蛋白与促凋亡蛋白Bcl-2/Bax比例下调;控制凋亡的关键酶Caspase-3酶活力上升。结论:(1)醋酸铅能够诱导C2C12成肌细胞存活率下降,细胞膜受损。(2)醋酸铅能诱导C2C12细胞氧化应激损伤,ROS启动的氧化应激反应可能是细胞损伤的主要途径。(3)醋酸铅诱导C2C12细胞出现凋亡损伤,也可能是细胞内ROS触发的。