背景结肠癌(colon cancer)是世界范围内常见的消化系统恶性肿瘤,严重危害人类健康,其发病率和死亡率在呈现上升的趋势,手术和放化疗是常用的治疗手段,但是随着药物使用的广泛性,出现了明显的耐受现象,因此寻找新的结肠癌治疗靶点成为研究的热点。研究显示出,酪蛋白激酶CK2参与多种肿瘤的发生发展过程,但是其对结肠癌细胞生物学行为的影响以及自噬在其中可能的作用还不是很清楚。目的明确CK2抑制剂对结肠癌细胞存活和凋亡的影响,探讨自体吞噬在CK2抑制剂诱导细胞毒性中的作用,为临床治疗结肠癌提供新的分子作用靶点以及联合用药策略。方法收集临床结肠癌和相应癌旁正常组织样本,免疫组织化学检测CK2α蛋白表达,统计学分析表达与临床病理学特征之间的关系;Western blotting检测组织样本内CK2α蛋白表达水平。体外培养不同结肠癌细胞(RKO,SW480,HCT116,LOVO),给予CK2抑制剂TBB进行作用,利用CCK8实验检测TBB对结肠癌细胞存活率的影响,Western blotting检测凋亡相关蛋白Caspase-3表达水平,Caspase-3激酶检测试剂盒检测Caspase-3活性改变。Western blotting检测自噬相关蛋白LC3和P62蛋白表达水平。联合自噬抑制剂3-MA和氯喹,CCK8检测联合作用对细胞存活率的影响;Western blotting检测凋亡相关蛋白caspase-3活性片段表达水平的改变。结果1.免疫组织化学检测结果显示,与癌旁正常组织相比较,结肠癌组织中CK2a蛋白表达水平明显升高,表达水平的升高与肿瘤大小(T stage)、淋巴结转移(N stage)和分化程度关系密切(P<0.05)。2.Western blotting结果显示,与癌旁正常组织相比较,结肠癌组织中CK2α蛋白表达水平明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.CCK8结果显示,不同浓度的TBB可以明显引起结肠癌细胞(RKO,SW480,HCT116,LOVO)存活率的下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。4.不同浓度的TBB作用于结肠癌RKO和HCT116细胞,Western blotting结果显示cleaved caspase-3蛋白表达水平升高,caspase-3酶活性检测结果显示caspase-3酶活性增强,差异均具有统计学意义(P<0.05)。5.Western blotting结果显示,不同浓度的TBB可以明显增加结肠癌RKO和HCT116细胞中自噬相关蛋白LC3-II表达,降低P62表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。6.联合TBB和自噬抑制剂3-MA或者氯喹作用于RKO和HCT116细胞,CCK8结果显示,细胞存活率进一步下降,western blotting结果显示cleaved caspase-3蛋白表达水平进一步升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论CK2α表达与临床结肠癌病理学特征密切相关,抑制CK2可以明显引起结肠癌细胞存活率的下降和凋亡的增加;联合自噬抑制剂可以进一步增加CK2抑制剂引起的细胞毒性。研究为临床治疗结肠癌提供新的联合用药策略。