暴发性肝衰竭的病因众多，但其发病机制多认为与机体免疫应答和单核细胞细胞因子(包括TNF—α，IL-1，IL-4，IL-6，IL-8)共同作用有关，T细胞的细胞毒性作用及免疫复合物激活补体系统，可引起肝细胞坏死。重型肝炎的免疫调控治疗就是应用免疫调节剂来减轻免疫病理造成肝细胞损伤。早年应用免疫抑制剂糖皮质激素(glucocorticoid，GC)治疗重型肝炎，因缺乏强有力的支持疗法和应用剂量过大而导致严重的不良反应，国外学者认为乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)感染导致的重型肝炎患者接受免疫抑制剂治疗可能出现HBV复制加剧，而导致肝细胞连续性坏死及肝功能进行性下降，最终因暴发性肝衰竭而死亡，因此一度被放弃用于治疗重型肝炎。 近年来，有人用GC联合干扰素(interferon，IFN)治疗重型肝炎取得了良好效果，认为激素可减轻IFN流感样反应，抑制细胞免疫活性作用，有助于重型肝炎渡过急剧加重期，IFN的抗病毒作用可在一定程度上控制因免疫抑制而出现的HBV复制。而生长激素(Growth hormone，GH)可以使去垂体动物受损的免疫功能恢复，具有广泛的促生长作用被试用治疗重型肝炎，并取得了初步经验，GH可增加肝脏对氨基酸的摄取，增加肝细胞蛋白质的mRNA表达，促进蛋白质的合成。在应用GC时联合GH则有可能取长补短，既能防止免疫功能亢进又可促进肝脏生长。我科在基础治疗支持下应用GC也成功的阻断了部分慢性乙型肝炎重度患者发展到重型肝炎。以上临床实践启示我们，有必要在动物实验的基础上，对糖皮质激素联合干扰素或生长激素对大鼠暴发性肝衰竭中的影响及其机制进行初步探讨。安徽医科大学硕士学位论文 拟以大鼠暴发性肝衰竭模型为基础，在不同时机，采用不同剂量、不同配伍的糖皮质激素介入，从体内和体外实验两个角度，通过病理学、生物化学和免疫学方法探讨GC联合IFN一或GH对暴发性肝衰竭(F HF)的影响和部分机理。如能证实较小剂量的GC即可成功阻断肝衰竭的发展并在联合应用IFN一Q或GH后仍有较好的阻断作用，将对指导临床用药具有一定意义。 因为肿瘤坏死因子。(TNF一a)是一种具有广谱生理和病理效应的细胞因子，主要由单核和巨噬细胞分泌。用TNF一Q完全可以诱发FHF，预先使用抗TNF一IgG后，可完全阻断小鼠肝细胞凋亡和坏死，小鼠全部存活，说明TNF一系FHF的重要致病因子l6]。而白细胞介素6(IL一6)是肝细胞急性期反应的产物，是由内毒素直接刺激的结果。暴发性肝衰竭的病人血清中IL一6水平与对照组相比显著升高，说明IL6的高浓度是肝损伤的一种表现。事实上，IL一6主要在肝脏清除，因此IL6升高可被看作是肝损伤的继发表现。IL一8是一种小分子量活性多肤，有较强的趋化和激活中性粒细胞作用，有人发现肝衰竭患者血清IL一8水平明显升高，并与肝损害程度及TNF一a含量呈正相关，提示IL一8也可能促进肝细胞的损害[7l。暴发性肝衰竭时可产生大量损害肝细胞的细胞因子，抑制损害因子有望提高暴发性肝衰竭患者生存率。 为此，本文首先建立了免疫性和化学性两种大鼠暴发性肝衰竭模型，体内实验时，通过病理学、生物化学和免疫学方法观察GC，GH，IFN一a对D一GalN几PS和CCI;致大鼠暴发性肝衰竭模型的肝脏病理变化和对血清TBil，ALT，AST，TNF一a，IL一8，IL一6水平的影响，以了解糖皮质激素联合干扰素、生长激素在阻断大鼠暴发性肝衰竭中的作用及其机制。因为LPS是使单核巨噬细胞分泌TNF一a的强烈诱导剂，本文又进一步分离、培养了大鼠肝脏细胞(HC)、枯否细胞 (KC)，利用LPS刺激，在体外实验时，通过免疫学方法进一步观察HC，KC培养上清中TNF一。变化，并在不同时机，采用不同剂量、不同配伍的糖皮质激素介入观察其对培养上清中TNF一a变化的影响，以证实体内实验的观察结果。常用的糖皮质激素有地塞米松、强的松和氢化可的松，因为地塞米松、强的松与血浆皮质激素蛋白结合率较氢化可的松为低，而且在体内需转化为氢化可的松和氢安徽医科大学硕士学位论文化强的松方生效，严重肝功能不全皮质激素蛋白减少，转化能力下降，因此，本研究选用了氢化可的松唬拍酸钠(Hydroeortisone sodium sueeinate，Hess)1体内实验研究结果(作用与机制): HCSS(25，50，loomg.kg一’，ip)预防给药可显著降低血清中升高的TBil，ALT，AST，TNF一a，IL一8，IL一6水平，明显低于模型组而接近正常组。其中50，100 mg.kg一，治疗组多数动物肝脏小叶结构清晰或基本正常，纤维组织少量增生，增生程度多在I一11级之间，肝细胞索清晰，肝细胞坏死偶见或少见，并见明显的肝细胞再生，与模型组病理变化特点形成明显的差异，与25 mgkg一，治疗组相比，亦有明显差异。提示HCSS在一定程度上可阻断CCI;，D一GalN/L PS致大鼠暴发性肝衰竭的发生和发展，且小剂量和中等剂量、大剂量组间有一定差异，但中等剂量、大剂量组间差异不明显。而其抑制CC14，D一GalN几PS致大鼠暴发性肝衰竭可能与其对TNF一Q，IL一8，IL一6的抑制有关。 HCsS(25，50，100 mg .kg一，，ip)在造模后4小时给药。发现在造模后4小时给药亦可降低血清中升高的TBil，A