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目的研究瘦素对体外培养的前脂肪细胞增殖、分化与脂质积聚的影响,以进一步阐明瘦素提高颗粒脂肪组织移植成活率的作用机理。方法采用前脂肪细胞培养技术,体外培养3T3-L1前脂肪细胞,用免疫荧光染色法检测细胞中瘦素受体的表达;在细胞中分别加入不同浓度的瘦素(0ng/ml、10ng/ml、50ng/ml、100ng/ml、200ng/ml、500ng/ml),作用24小时后通过MTT比色法和3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法分别检测各组细胞的增殖情况;应用ERK1/2激酶特异性抑制剂PD98059阻断ERK1/2磷酸化,作用24小时后观察其对50ng/ml瘦素的促进细胞增殖作用的影响;应用免疫印迹技术检测不同浓度瘦素(0ng/ml、50ng/ml、100ng/ml、200ng/ml)作用于细胞12小时后细胞内ERK1/2的活化水平(以p-ERK1/2与ERK1/2的比值表示);用50ng/ml瘦素+0.5mmol/L IBMX+1.0μmol/L地塞米松刺激3T3-L1前脂肪细胞,在诱导分化的第6天和第9天,测定细胞内甘油三酯(TG)的含量;并于诱导分化的第9天检测对细胞内3-磷酸甘油脱氢酶(GPDH,前脂肪细胞分化的晚期标志物)活性的影响。结果免疫荧光检测证实3T3-L1前脂肪细胞存在瘦素受体的表达;MTT比色法和3H-TdR掺入法均显示,瘦素浓度为100ng/ml以下时促进3T3-L1前脂肪细胞增殖,浓度达200ng/ml以上反而抑制细胞增殖,当浓度为50ng/ml时其增殖效应达最大;ERK1/2激酶特异性抑制剂PD98059能明显抑制50ng/ml瘦素对前脂肪细胞的促增殖作用;细胞经不同浓度的瘦素处理12小时后,ERK1/2的活化水平明显增高,呈剂量依赖性变化;在瘦素刺激前脂肪细胞分化的过程中,细胞中甘油三酯的含量和3-磷酸甘油脱氢酶的活性明显高于对照组和IBMX+DEX组。结论瘦素对前脂肪细胞增殖的影响呈双向作用,可能与细胞外信号调节激酶1/2信号转导途径有关;50ng/ml瘦素能促进前脂肪细胞的分化与脂质积聚。