1.rEx160重组蛋白疫苗抑制日本血吸虫感染家兔肝脏纤维化的研究 2.TIGIT信号在日本血吸虫感染小鼠Th1/Th2平衡中的作用研究

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目的探究anti-Ex160抗体是否能够有效抑制家兔肝脏中虫卵内毛蚴的成熟,减轻肝脏纤维化的程度,并进一步阐述其机制。方法家兔分为6组,分别是:PBS+Nc、PBS+Sj、PBS+Adjuvant+Sj、PBS+Buffer+Sj、Buffer+Adjuvant+Sj、rEx160+Adjuvant+Sj。按上述分组分别于0w、2w、4w免疫家兔三次,每次免疫的抗原量为400ug/只;并且分别于0w、2w、4w、6w、9w、11w、14w通过耳缘静脉采血,检测不同周次血清中anti-Ex160抗体水平,以及血清AST,ALT和HDL-C的水平;最后一次免疫两周后,各组家兔经腹部感染日本血吸虫尾蚴100±2条;感染8w后,剖杀所有家兔,经肝门静脉灌注法收集成虫;检测肝脏卵荷以及卵内毛蚴成熟度;取肝脏组织进行天狼星红染色;分析各组家兔肝脏纤维化的程度,并进行分析比较。结果免疫3次后,ELISA结果显示rEx160免疫组家兔血清抗体水平显著增高,提示rEx160特异性Ig G抗体被成功诱导。rEx160+Adjuvant+Sj组肝脏的纤维化程度明显减轻,说明rEx160可有效减轻血吸虫感染所致的肝脏纤维化。然而各组家兔体内的虫荷、卵荷及每对成虫的产卵数目均未有显著性差异,且血吸虫感染后0、3、5、8周的血清转氨酶水平也未发生改变,提示我们rEx160不影响虫荷、卵荷以及肝细胞的损伤。我们发现rEx160+Adjuvant+Sj组肝内虫卵毛蚴的成熟度明显下降,免疫rEx160组血清中HDL-C的浓度显著高于其他感染对照组。结论rEx160可减轻血吸虫感染所导致的肝脏纤维化,且rEx160可抑制虫卵内的毛蚴发育成熟。目的日本血吸虫感染过程中,研究TIGIT信号在Th1/Th2反应平衡中的作用。方法建立日本血吸虫感染C57BL/6小鼠模型,以未感染C57BL/6小鼠作为正常对照。分别于感染后的第0、3、5、8、13周取小鼠的脾脏细胞,采用流式细胞术检测TIGIT阳性细胞的比例,以及TIGIT阴性和TIGIT阳性细胞上Ki67、IFN-γ、IL-4的表达水平。结果感染组(Sj组)小鼠脾脏CD4+T中TIGIT+细胞的比例为(29.30%±0.70%),正常对照组(Nc组)的比例为(3.09%±0.50%),可见感染血吸虫后小鼠脾脏CD4+T中TIGIT+细胞的比例会显著升高(t=29.09,P<0.0001);然而,Sj组小鼠脾脏中CD8+T中TIGIT+细胞的比例为(3.61%±0.26%),Nc组小鼠脾脏中的比例为(3.58%±0.16%),两组比例相比较无统计学差异(t=0.108,P=0.9192);同时,Sj组非T细胞中TIGIT+细胞的比例(1.86%±0.19%)与Nc组的比例(1.37%±0.17%)相比,也没有显著性差异(t=1.931,P=0.1257)。进一步研究发现,细胞增殖标志物Ki67在TIGIT+细胞上表达的比例为(17.03%±0.64%),明显高于其在TIGIT-细胞上表达的比例(6.59%±0.37%)(t=14.09,P=0.0001),在CD4+TIGIT+细胞中,Th2/Th1的比值(39.28%±3.75%)明显高于其在CD4+TIGIT-细胞中的比值(11.79%±1.64%)(t=6.721,P=0.0026)。结论我们的实验结果提示感染日本血吸虫后CD4+T细胞上TIGIT的表达增加,且TIGIT可能通过诱导Th2型免疫细胞的增殖从而促进Th2型细胞比例的增加。
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