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龙须菜(Gracilaria lemaneiformis)是江蓠属(Gracilaria)的一种温带性红藻,原产于我国的山东沿海和日本冲绳岛。龙须菜硫酸酯多糖含量约占藻体干重30%,是一类高活性物质,具有免疫调节、抗氧化、降血糖、降血脂、抗凝血、抗肿瘤、抗病毒及保护肾脏作用等多种生理活性和药理活性。硫琼脂是琼脂的重要组成成分之一,本研究以龙须菜为原料,探讨从龙须菜琼脂中提取硫琼脂的最佳工艺条件,纯化和分析硫琼脂,并对其部分生物活性进行研究。1、采用EDTA-Na2法提取硫琼脂并结合硫酸钡比浊法及苯酚-硫酸法分别测定硫琼脂的含量硫酸根含量和总糖含量。在单因素试验的基础上,利用响应曲面法优化提取工艺,建立了EDTA-Na2加入量(A)、洗脱时间(B)和洗脱温度(C)与硫琼脂的主要理化指标(硫酸根+总糖)含量(Y)之间的数学模型,确定了硫琼脂的最佳提取工艺条件为:EDTA-Na2加入量为5.90g/L、洗脱时间为2.2h、洗脱温度为53℃。按此最佳工艺提取的硫琼脂的主要理化指标(硫酸根+总糖)含量为(84.00±0.45)%。2、采用EDTA-Na2浸提法提取硫琼脂,经DEAE Cellulose-52层析柱分段梯度洗脱得到3个多糖组分(SPS-1、SPS-2及SPS-3),并结合离子色谱法、高效液相色谱法、紫外光谱分析、红外光谱等多种分析手段,对其硫酸基含量、相对分子质量、纯度、单糖组成、特征键进行测定。结果表明,SPS-1、SPS-2、SPS-3的得率分别为2.7%、47.2%、2.2%,硫酸根含量分别为5.1%、9.3%、6.3%;硫琼脂结构中不含蛋白质、氨基酸和核酸;SPS-2中含有一种相似链长的多糖,其含量高达92.14%,重均相对分子质量Mw为367686,数均相对分子质量Mn为230434。可初判断,其是由17.34%半乳糖、2.72%棉籽糖、8.82%蔗糖和1.18%阿拉伯糖等组成的结构复杂的硫酸酯多糖。3、为探讨硫琼脂降血糖、降血脂活性及其体外抗氧化作用,通过对超氧阴离子(·O2-)、羟基自由基(·OH)及1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除效果的研究评价硫琼脂的体外抗氧化活性;建立四氧嘧啶高血糖小鼠模型和高脂饲料高血脂大鼠模型,给予不同剂量的硫琼脂设计动物实验,以测定的小鼠空腹血糖值、大鼠血脂水平(TC、TG、HDL-C、LDL-C)以及血清、肝脏的生化指标值,研究硫琼脂的降血糖、降血脂活性。结果表明硫琼脂对·O2-、·OH及DPPH均有较好的清除作用,可显著降低高血糖小鼠的空腹血糖值,增加体重,提高免疫力,增加肝糖原含量,调节GSP水平,维持血清胰岛素在正常水平。同时也可显著降低高血脂大鼠的TC、TG、LDL-C含量,提高HDL-C含量,能明显减缓高血脂症大鼠体重增长的速度,提高血清、肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)等抗氧化酶活性,降低NO酶活性及体内MDA含量。由此可见硫琼脂具有降血糖、降血脂及体外抗氧化活性。