苦瓜应答白粉菌侵染的转录组分析

来源 :海南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ltycongc2008
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白粉病是瓜类蔬菜生产中重大威胁之一,其发生严重制约着苦瓜的产量与品质,造成巨大的经济损失。苦瓜(Momordica charantia.L)是我国重要瓜菜之一,本研究对苦瓜白粉菌分生孢子的萌发条件展开研究,并进行不同抗性苦瓜品系与白粉菌之间的转录组分析。以纯化后活体保存的苦瓜白粉病菌分生孢子为材料,进行不同光质及光照时间、温度、湿度、p H、供氧、碳氮源处理,获得不同处理下苦瓜白粉病菌分生孢子的萌发率。再利用活体保存的苦瓜白粉菌接种高代自交的hai09-1(感)与hai09-2(抗)苦瓜品系,分别对接种后的12、24、36、48、72、96小时的苦瓜以及0小时的苦瓜叶片进行转录组测序,并开展白粉病抗性的转录组分析。1.适宜苦瓜白粉菌分生孢子萌发的温度区间为20~30℃,最适萌发温度为25℃,致死温度为48℃、10 min;最适分生孢子萌发的相对湿度为100%,最适p H为7;全黑暗环境最适于孢子萌发;全氧条件下分生孢子萌发率始终显著高于半氧以及无氧处理;紫光不利于分生孢子萌发,红、黄和绿光对分生孢子萌发有一定的促进作用;苦瓜白粉病菌最喜葡萄糖,甘露醇有一定的促进萌发的作用,多糖不利于分生孢子的利用;氮源抑制苦瓜白粉病菌分生孢子萌发。2.hai09-1与hai09-2响应白粉菌侵染主要差异体现在自噬-其他(csv04136)、MAPK信号通路(csv04016)、植物激素信号转导(csv04075)、植物病原体互作(csv04626)、苯丙烷生物合成(csv00940)通路上。3.对苦瓜响应白粉菌胁迫途径上的差异基因表达量比较分析,编码CNGCs蛋白的基因中LOC111024714与LOC111007411基因在hai09-1中48 hpi之后被抑制表达,抗病hai09-2中被诱导表达。Ca M一个编码基因LOC111021283在hai09-2中48-96 hpi上调,而在hai09-1中48 hpi开始直到96 hpi均被抑制表达。Rboh中相关的4个编码基因novel.481、LOC111015347、LOC111025422、LOC111008521在hai09-2中均上调表达;编码病程相关蛋白PR1的基因其中一个(LOC111017362)在12 hpi抗感苦瓜中均未诱导表达,此后表达量呈总体上升趋势,抗病苦瓜在24 hpi开始上调,较感病苦瓜(36 hpi)更早上调表达,且相对表达量更高。另一基因LOC111017374在感病苦瓜中被抑制表达,抗病苦瓜的前期被抑制,48 hpi开始持续高表达。由此得出结论:苦瓜白粉病菌分生孢子萌发的最适温度和致死温度分别为25和48℃、10 min,喜高湿、黑暗和中性环境,好氧,喜葡萄糖,萌发不需氮源,长波光质较短波更有利于苦瓜白粉病菌分生孢子萌发。抗、感苦瓜品系在响应白粉菌侵染中,抗、感苦瓜抗病能力在时间上的差异体现在36-72hpi,抗病苦瓜hai09-2能快速的调动更多基因抵御白粉菌侵染。苦瓜白粉病在代谢通路上抗性信号转导,自噬等方面,前期抗性苦瓜比感病苦瓜能更迅速的响应白粉菌侵染,后期感病苦瓜在以上途径被显著抑制。抗感苦瓜在受白粉菌胁迫下传递钙离子信号能力存在差异,抗病苦瓜能更迅速传递Ca2+信号,诱导植物细胞壁强化与超敏反应等防御反应。白粉菌胁迫下合成抵御病原物的病程相关蛋白PR1的能力存在差异,抗病苦瓜在侵染中期诱导表达,感病苦瓜被抑制合成,这些均可能导致二者的抗性差异。
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