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三磷酸腺苷结合盒转运体 A1（ATP binding cassette transporter Al,ABCA1）是一种膜结合蛋白,主要负责介导胆固醇流出至贫脂的载脂蛋白AI（apolipoprotein AI,apoAI）。过去一直认为ABCA1对巨噬细胞胆固醇稳态与功能的调控是其抗动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）作用的重要机制。但是,与对照小鼠相比,巨噬细胞特异性敲除ABCA1的小鼠体内动脉粥样硬化病灶的生成与发展并没有显著地改变,这也提示ABCA1发挥抗动脉粥样硬化作用的靶细胞不是巨噬细胞。最新的研究发现T细胞介导的获得性免疫在动脉粥样硬化发展中发挥着重要作用。然而,ABCA1在T淋巴细胞胆固醇稳态与功能中的作用尚不清楚。目的:探究T淋巴细胞上胆固醇转运子ABCA1的缺失对T细胞胆固醇稳态及细胞功能的影响。方法:通过Cre/Loxp重组技术制备T淋巴细胞特异性ABCAl基因缺失小鼠(ABCAlCD4-/CD4-)。应用PCR扩增和Q-PCR技术,对小鼠进行基因水平和mRNA水平的表达鉴定。运用胆固醇外流实验及流式细胞术检测细胞膜脂筏含量实验进一步明确ABCA1的特异性缺失。我们选用了两个动物模型来探讨ABCAl缺失对T细胞功能的影响:（1）利用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG）的抗原多肽MOG35-55免疫小鼠构建实验性变态反应性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE）模型。（2）制备低密度脂蛋白受体（low-density lipoprotein receptor,LDLr）敲除背景下T淋巴细胞特异性 ABCAl1缺失小鼠(ABCAlCD4-/CD4-LDLr-/-)及其对照小鼠,高脂饲料喂养诱导动脉粥样硬化病灶的形成。在EAE模型中,我们对小鼠的发病进行病程评分,运用组织学染色明确小鼠脊髓的炎性浸润及脱髓鞘水平发病程度。针对AS模型,油红染色检测小鼠主动脉弓底病灶的大小,免疫组化分析病灶的组分及T细胞浸润情况。流式细胞术检测两个模型小鼠体内T细胞活化、增殖、分化及凋亡情况。结果:ABCAlCD4-/CD4-小鼠脾脏中CD4+T细胞上ABCAl的表达仅为对照组小鼠的10%（P<0.001）。而在不含T淋巴细胞的脾细胞中,ABCA1的表达水平在两组小鼠间并无差异,这表明ABCAlCD4-/CD4-小鼠体内ABCA1的敲除的确只发生在了 T淋巴细胞上。胆固醇流出实验结果显示,ABCA1的缺失显著地抑制了 T细胞上胆固醇流出至apoAI（0.28倍,P<0.001）,但对HDL介导的胆固醇流出影响不大。有趣地是,胆固醇流出障碍并没有增加反而轻微地减少了 T细胞表面胆固醇富集区-脂筏含量（CD4+T:0.91 倍,CD8+T:0.93 倍,P<0.01）。ABCA1的缺失并不影响T细胞在胸腺中的发育,但会影响外周T细胞的生成与表型。基因敲除小鼠外周器官中尤其是外周血（0.79倍,P<0.05）与脾脏（0.86倍,P<0.05）中记忆效应CD4+T细胞的数量显著地下降。这可能是ABCA1缺失能够抑制CD4+T细胞活化（CD25+%:～0.85倍,P<0.05）进而抑制细胞增殖（～0.85倍,P<0.05）并促进其凋亡（～1.15倍,P<0.05）的结果。ABCAl的缺失尽管不利于胸腺中自然发生调节性T细胞（Tregs）的生成（0.85倍,P<0.05）,但可促进外周及体外Treg的诱导分化（～1.20倍,P<0.05）。在MOG35-55抗原多肽诱导EAE的免疫模型中,与对照小鼠相比,ABCAlCD4-/D4-小鼠EAE发病的严重程度显著降低（0.54倍,P<0.001）。T细胞上ABCA1的缺失抑制了小鼠体内脾脏中CD4+T细胞的增殖（～0.51倍,P<0.01）,这与体外MOG抗原性特异性增殖减少（0.65倍,P<0.05）一致。此外,ABCA1基因的缺失还促进了脾脏与脊髓中调节性T细胞（Tregs）的增多（脾脏:1.23倍;脊髓:1.70倍,P<0.05）,并抑制了病理性Th17效应细胞（脾脏SPC:0.67倍;脊髓:0.60倍,P<0.05）的分化。给予雄性ABCAlCD4-/CD4-LDLr-/-小鼠和ABCAlflox/flox LDLr-/-小鼠9周高脂饮食以诱导动脉粥样硬化斑块的形成。尽管两组小鼠的外周血总胆固醇水平无差异,但T淋巴细胞上ABCA1的特异性缺失却抑制了动脉粥样硬化斑块的发展（0.79倍,P<0.05）。并且显著地抑制了斑块内及斑块血管外膜中T细胞的浸润（斑块:0.58倍,P<0.05;外膜:0.68倍,P<0.05）。ABCAl在T细胞中的特异性敲除对高脂水平下T细胞在胸腺中的发育与外周T细胞的生成并无影响。但是记忆性CD4+与CD8+T细胞在脾脏中都显著减少,这可能是体内T细胞活化增殖减少的结果（～0.74倍,P<0.05）。有意思的是,ABCAl缺失在高脂水平下并不促进Tregs的分化,但显著地抑制了病灶周围淋巴结内效应CD4+Th1（0.57倍,P<0.05）与CD8+TC1（0.72倍,P<0.05）细胞的分化。结论:1、ABCA1介导了 T淋巴细胞上胆固醇流出至apoAI,在对T淋巴细胞胆固醇稳态中发挥重要作用;2、T淋巴细胞上ABCA1的缺失可减弱EAE发病的严重程度,此作用可能是通过抑制细胞增殖促进活化细胞凋亡,进而改变Treg与效应Th17细胞平衡的结果;3、T淋巴细胞ABCA1缺失可能是通过减少记忆效应T细胞进而抑制效应细胞Th1和TC1生成来抑制动脉粥样硬化的发展。因此,抑制T淋巴细胞上ABCA1可能是治疗免疫类疾病如EAE与动脉粥样硬化的潜在策略。