外泌体因其在生物系统中的基础作用,成为早期发现和治疗癌症的新型标志物而受到广泛关注。外泌体作为细胞间信息传递的载体,参与肿瘤细胞的发生、转移、耐药性和免疫逃逸,对疾病的传播具有重要作用。体液中包含的大量循环外泌体也通常会携带与癌症相关的生物信号分子。因此,灵敏的外泌体分离和分析技术,在临床检测中至关重要。我们开发了基于玻璃纳米电极的新方法,制备多功能纳米探针(MNNP)进行外泌体检测。本研究主要集中于MNNP在保证细胞活性的同时,对单个人类宫颈癌(HeLa)细胞释放的外泌体进行实时检测。主要研究内容如下:1.制备基于碳电极(CNEs)的MNNPs,并结合电阻脉冲传感技术对HeLa细胞的外泌体分泌行为进行实时检测。分析纳米孔处由于外泌体易位行为诱发的电流信号,并检测电流阻塞时间(△t)。2.在CNE表面修饰CD63抗体,优化MNNPs对外泌体的靶向性。结合电化学方法制备CD63抗体修饰的多功能纳米电极(anti-CD63 MNNPs),并对外泌体和脂质体诱发的易位行为进行研究。3.MNNPs实时检测单个活细胞外泌体的分泌。外泌体抑制剂GW4869与HeLa细胞共孵育后,检测到外泌体易位行为诱发的电流信号数量明显减少。同时,用未修饰抗体的MNNPs对细胞的检测作为对照试验,证实修饰抗体的靶向性。