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目的 利用异位小肠移植模型，研究小肠移植术后外周血CD45相关淋巴细胞亚群改变和移植小肠组织的CD45分子及其剪接变构体mRNA转录变化规律，探讨CD45分于及其剪接变构体作为诊断小肠移植排斥反应早期标志物的可行性；通过测定移植小肠组织IL-2R α链(CD25)和INF-γ mRNA的转录，研究小肠移植排斥反应时免疫活性细胞发生变化的内在机制。方法采用显微外科技术，建立近交系大鼠异位小肠移植模型，包括F344→F344同系移植组(ITxtransplantation，IT_x组)6只，BN→F344同种移植组(ATxtransplantation，AT_x组)6只，并于术后(postoperative day)0、3、5、7、9天5个时点获取标本。利用流式细胞计(FCM)，测定受体外周血CD4~-CD45~-、CD4~-CD45RC~-、CD8~-CD45~-、CD8~-CD45RC~-细胞和CD4~-CD45RC~-／CD4~-CD45RC~-、CD8~-CD45RC~-／CD8~-CD45RC~-比值的改变；采用RT-PCR技术，测定两组受体移植小肠组织中CD45、CD45R0、CD45RC、IL-2R α链、INT-γ mRNA转录水平及CD45RC／CD45R0比值变化；将外周血和移植小肠组织的以上检测结果同同时点的病理组织改变进行比较。结果移植小肠组织病理显示，ITx组与ATx组大鼠POD0的移植小肠结构无明显改变，POD3时出现轻度非特异性炎症表现，以后ITx组病理改变逐步恢复正常，而ATx组POD5、7、9的表现，分别符合轻度非典型性的，中度和重度排斥反应的诊断标准。受体外周血CD45相关淋巴细胞亚群的流式细胞仪检测显示，ITx组和ATx组CD4~-CD45~-和CD8~-CD45~-细胞亚群术后5个检测时点的改变均无显著性差异；ITx组的CD4~-CD45RC~-细胞，POD3显著增高，以后迅速恢复至POD0水平，而ATx组的改变高峰延迟到POD5以后才 天滩医抖大毕了士研兑土论文qgCfk昙 缓慢下降，ATX 组 PODS 和 POD7 的改变显著高于 yX 组； CD4－CD45RC－／CD4－CD45RC“比值在ITX组于POD3显著升高后即迅速降至 PODO水平，而ATX组POD3、5却维持在增高水平，ATX组的比值PODS、 7、9显著高于＊X组。ITX组CDS－CD45RC”亚群POD3改变达至高峰以后 缓慢下降，至PODg才恢复至PODO水平，而ATX组POD3至PODg持续维 持在显著升高水平，AT：组POD3、5、7、9时点的改变显著高干ITX组： CDS－CD45RC－／CDS－CD45RC十c值在ITX组POD3升高达峰值后迅即下降至 PODO水平，AIX组POD3、5、7、9的比值均显著高于PODO，ATX组POD3、 5、7显著高于rx组。移植小肠 RTPCR检测发现，ITx组 CD45 mKNA转 录在术后S个时点无明显变化，而AIX组在PODg的转录显著增高，并且显 著高于＊X组PODg的转录水平：CD45RO InRNA转录在nX组术后 5个时 点无明显变化，而在ATX组POD7、9转录逐渐升高，显著高于ITX组POD7、 9的转录水平：CD45RC fnRNA转录在ITX组术后各时点转录无显著性差异， 而在 AIX组 POD 3转录水平迅速升高并维持至 PODg，但 ATX组 PODS、7、 9转录显著高于 ITX组：CD45RC／CD45RO Li值，ITX组和 ATX组术后各时 点均无明显差异，AT。组比值 PODS、7、9显著高于 ITX组：IL－ZR Q链 InRNA 转录，ITX组术后各时点无显著注差异，ATX组POD3、5、7、9的转录水平 均显著高于PODO的转录水平和 ITX组同时点转录水平。ITX组术后各时点 INF－Y mRNA转录无显著性差异，而 ATX组 POD3开始升高，POD7达高峰， PODg稍有下降，AIX组 POD3、5、7的 IN’F－Y InRNA转录水平显著高于 ITX 组。结论近交系“低反应”品系大鼠（BN－F344）的异位小肠移植模型能 很好的反映小肠移植排斥反应轻、中、重三个层次的演变过程，可能更适合 于个肠移植排斥反应研究。外周血CD4”CD45RC一、CDS”CD45RC”细胞和 CD4－CD45RC”／CD4－CD45RC“、CDS”CD45RC”／CDS”CD45RC十C值 POD3的 升高可能与移植物的缺血再灌注损伤有关。CD4CD45RC－细胞可能具有免疫 诱导功能，对排斥反应的发生起触发作用；而CDSCD45RC”细胞可能具有 天十巨科大学硕士研死主论文？耍 细胞毒细胞活性，在排斥反应的效应阶段发挥重要作用。对移植术后外周血 CD4工D45－及CDS（D45”亚群的检测无助于排斥反应的诊断； CDS－CD45RC－亚群和 CDS－CD45RC－／CD－SCD45RC“比值的改变有助子排斥 反应的早期诊断却与排斥反应的轻重无关；CD4－CD45RC”细胞和 CD4”CD45RC丫CD4－CD45RC‘比值适于术后受体免疫状态的监视，并与排斥 反应的分级有关。移植小肠组织 CD45RC和 CD45RO InRNA转录水平升高均 与排斥反应有关，但测定CD45RCrrlltNA转录和CD45RC／CD45RO比值能更 早的诊断排斥反应的发生。IL－ZR a链和 I：NF．Y InRNA转录的检测，既可早 期诊断排斥反应，也可反映移植物浸润免疫活性细胞的原位激活状态。