【摘 要】
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目的:探究环状RNA（Circular RNA,CircRNA）hsa-CircRNA-0001009靶向调控miRNA-22-3P/HMGB1通路对髓母细胞瘤生物学功能的影响。方法:通过基因芯片筛选出miRNA-22-3P上游靶基因hsa-CircRNA-0001009,双荧光素酶进一步验证miRNA-22-3P与hsa-CircRNA-0001009的分子海绵关系。查阅相关文献预测miRNA-
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目的:探究环状RNA（Circular RNA,CircRNA）hsa-CircRNA-0001009靶向调控miRNA-22-3P/HMGB1通路对髓母细胞瘤生物学功能的影响。方法:通过基因芯片筛选出miRNA-22-3P上游靶基因hsa-CircRNA-0001009,双荧光素酶进一步验证miRNA-22-3P与hsa-CircRNA-0001009的分子海绵关系。查阅相关文献预测miRNA-22-3P的下游靶基因HMGB1,通过qRT-PCR验证髓母细胞瘤临床标本中hsa-CircRNA-0001009表达,WB及免疫组化检测HMGB1蛋白的表达及定位。使用慢病毒构建低表达hsa-CircRNA-0001009的髓母细胞系DAOY,验证抑制hsa-CircRNA-0001009的表达对miRNA-22-3P及HMGB1表达的影响,然后通过CCK-8实验、细胞克隆形成、细胞划痕愈合、Transwell小室侵袭迁移、流式细胞仪等检测方法,探究hsa-CircRNA-0001009对髓母细胞瘤DAOY细胞生物学功能的影响。使用miRNA-22-3P抑制剂,探究了miRNA-22-3P抑制对hsa-CircRNA-0001009及HMGB1蛋白的表达影响,再次验证对细胞的增殖、凋亡及表达的影响。最后用动物异种移植模型观察hsa-CircRNA-0001009表达对体内肿瘤的影响。结果:与正常脑组织相比,髓母细胞瘤组织中hsa-CircRNA-0001009和HMGB1的表达升高。hsa-CircRAN-0001009作为miR-22-3P的分子海绵调节了髓母细胞DAOY细胞系的增殖、迁移、侵袭和凋亡,进一步调节下游靶基因HMGB1的表达。小鼠异种移植模型也证实了hsa-CircRNA-0001009低表达抑制了肿瘤的增殖。同时,抑制miR-22-3P表达促进hsa-CircRNA-0001009的表达和HMGB1的表达,并促进了肿瘤的增殖、抑制了肿瘤的凋亡。结论:hsa-CircRNA-0001009和miRNA-22-3P/HMGB1构成了髓母细胞瘤调控通路,影响了髓母细胞DAOY细胞系的增殖、迁移、侵袭和凋亡,可能成为髓母细胞瘤的治疗靶点之一。
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