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人体是由不同类型的细胞组合并受到严格调控的多细胞有机体,但是当有些细胞如癌细胞脱离了这个细胞社会的制约时,它会无限的增殖并入侵到机体的其他部位。1990年至2017年,肿瘤从伤残调整生命年主要原因的第六位上升至第二位。虽然针对肿瘤的治疗水平逐渐提高,但是对于肿瘤的发病原因依然没有得到根本的解释。Sigelc-15作为Siglec家族的一员是一种经典的唾液酸结合蛋白,是一种I型跨膜蛋白。以往对Siglec-15的研究主要集中在破骨细胞分化和骨重塑,对于它的免疫功能虽有探究但是不多。而陈列平在2019年上半年发表的关于巨噬细胞上表达的Siglec-15作为一种免疫抑制分子是一种潜在的靶点,使它成为了研究热点。但是对于它在肿瘤细胞上的表达对肿瘤细胞的影响尚待研究。研究目的:探讨Siglec-15对结直肠癌细胞生物学功能的影响并研究其作用机制。研究方法:1.通过对肿瘤组织和正常组织进行免疫组织化学染色,研究Siglec-15在肿瘤组织和正常组织表达的差异。2.检测Siglec-15在正常结直肠细胞系以及多种结直肠癌细胞表达的差异。3.构建Siglec-15低表达细胞株。4.用CCK8法检测对照组与Siglec-15低表达组的增殖水平,同时用流式细胞术检测两组的周期和凋亡。5.通过Transwell检测两组在迁移和侵袭的差异。6.Western blot检测影响肿瘤细胞增殖,侵袭和迁移关键蛋白的表达。7.进一步体内实验进行验证,构建皮下荷瘤小鼠模型。研究结果:1.对101例结直肠癌组织和79例癌旁组织进行免疫组织化学染色,实验结果显示结直肠癌组织的Siglec-15表达水平要明显高于癌旁组织,差异结果具有统计学意义(P<0.05)。2.用Western blot检测正常结直肠细胞NCM460 与结直肠癌细胞HCT116,RKO,HCT8,SW480的Siglec-15表达水平,结果可得正常结直肠细胞Siglec-15的表达水平要低于结直肠癌细胞,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.通过慢病毒成功构建Siglec-15稳定低表达结直肠癌细胞株,并用CCK8法检测细胞的增殖能力。结果表明,在种板后的24 h,72 h,96 h,Siglec-15低表达组的增殖水平要低于对照组,结果具有统计学意义(P<0.05)。4.对Siglec-15稳定低表达组和对照组的Transwell结果分析,Siglec-1 5低表达组迁移和侵袭的细胞数目要少于对照组,结果具有统计学意义(P<0.05)。5.用Westernblot和IHC对两组细胞的p53,p21,Bcl-2,Bax,E-cad的蛋白表达水平以及基因转录水平进行检测,结果表明相对于对照组,Siglec-15低表达组的p53,p21,Bax,E-cad蛋白表达和基因转录水平升高,Bcl-2降低,结果具有统计学意义(P<0.05)。6.裸鼠皮下荷瘤实验结果表明,Siglec-15低表达组的肿瘤大小和生长速度显著低于对照组,结果具有统计学意义(P<0.05)。用Western blot和IHC检测了两组肿瘤的Siglec-15和p53蛋白表达,结果表明Siglec-15 低表达组的 Siglec-15 蛋白表达水平低于对照组,p53 蛋白表达水平高于对照组,结果具有统计学意义(P<0.05)。研究结论:Siglec-15在结直肠癌肿瘤组织和肿瘤细胞中的表达水平要明显高于正常组织和细胞,并且肿瘤细胞的Siglec-15表达降低后,能够通过促进p53,p21表达,抑制Bcl-2表达,促进Bax以及E-cad表达,影响结直肠癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭,抑制小鼠皮下肿瘤的生长。