Kank 1基因在鼻咽癌发病中的作用研究

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背景:鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)是我国南方及东南亚地区最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率均居世界首位,是一种中国特色癌,严重危害国人的生命和健康。虽然目前的研究结果认为NPC的发病与EB病毒感染、遗传因素和环境因素有关,但NPC的发病机制仍然不清楚。Kank 1(kidney ankyrin repeat-containingprotein 1)基因是从肾细胞癌中克隆的一种潜在的肿瘤抑制基因,具有多种生理与病理功能,但Kank 1基因与NPC之间的关系还未见文献报道。方法:采用RT-PCR和real-time RT-PCR技术检测Kank 1基因在4株NPC细胞株(CNE1、CNE2、5-8F、6-10B)、永生化鼻咽黏膜上皮细胞株NP69、NPC组织和正常鼻咽粘膜组织中的表达水平。采用脂质体转染方法分别将pCMV-Kank 1和空白载体pCMV-vec转染高转移的5-8F NPC细胞,建立稳定转染细胞系。以稳定转染细胞系为样本,Transwell小室侵袭迁移实验检测kank 1表达上调对NPC细胞的侵袭迁移能力的影响;MTT、流式细胞仪、Hoechst染色和软琼脂集落形成实验检测Kank 1表达水平改变对NPC细胞增殖、细胞周期分布、细胞凋亡和停泊非依赖性生长能力的影响。结果:(1)Kank 1基因mRNA在四株鼻咽癌细胞株中的表达明显低于NP69细胞,在NPC组织的表达比正常鼻咽粘膜组织的表达明显下调;(2)建立了Kank 1表达上调的稳定转染5-8F细胞系;(3)上调Kank 1在5-8F细胞中的表达水平能抑制其增殖和停泊非依赖性生长、导致其发生G0/G1期阻滞、促进细胞凋亡;(4)上调Kank 1在5-8F细胞中的表达水平能明显降低其体外迁移侵袭能力。结论:Kank 1 mRNA在NPC细胞株和NPC组织中的表达下调,Kank 1表达上调具有抑制5-8F细胞增殖、降低5-8F细胞体外侵袭迁移能力以及促进5-8F细胞凋亡的作用。研究结果提示,Kank 1表达下调可能在NPC发生发展中具有重要作用。
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