非洲猪瘟（ASF）是由非洲猪瘟病毒（ASFV）感染引起的一种接触性传染疾病,且具有高致病性,给全球的养猪业带来了严重的威胁以及经济损失。该病的主要表现症状:淋巴结和皮肤及内脏器官严重出血、高热、水肿、呼吸困难等。ASF常发生跨国传播,在国际上被列为重要的检疫对象,在我国也是作为一类动物疫病进行防护。目前对于ASF还没有有效的疫苗以及药物可用于预防本病,尚存在一些未净化该病的国家,仍需要通过必要的检测对疫病进行控制。合理有效的监测,不仅有利于主管部门对该疫情的把控,而且也利于养殖场实时监察猪群的健康情况。在此背景下,本研究建立了非洲猪瘟病毒PCR和荧光定量PCR的检测方法,为临床预防工作提供参考。本研究选取的聚合酶链式反应（PCR）检测方法参考GenBank上公布的非洲猪瘟病毒（ASFV VP72）基因序列,使用Primer Premier 5.0设计了 3对常规PCR特异性引物,分别为539-F/R、Premier1-F/R和 Premier2-F/R。同时用 Primer Express Software（v.3.0）软件设计荧光定量PCR引物对VP72-F/R,随后以合成的完整的VP72基因序列构建标准阳性质粒及进行特异性试验,建立非洲猪瘟病毒PCR和荧光定量PCR的检测方法。同时将本实验建立的非洲猪瘟病毒PCR检测方法与OIE推荐的PCR方法在敏感性和特异性方面的进行比较分析,以及将建立的非洲猪瘟病毒荧光定量PCR方法与商品化的非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒进行对比试验。本实验建立的非洲猪瘟病毒PCR和荧光定量PCR方法的特异性实验结果显示只有构建的标准阳性质粒得到了有效的扩增,而CSFV、PEDV、RV、PRV、PCV2、PPV六种病毒没有得到扩增,证实了两种方法均具有良好的特异性。敏感性方面,本试验设计的两种PCR方法最低检测限分别达到了 10-10和10-9,而OIE推荐使用的引物的最低检测限为10-7。证明本研究建立的非洲猪瘟病毒PCR方法比OIE推荐的PCR方法具有更高的敏感性。同时本研究建立的非洲猪瘟病毒荧光定量PCR能够检测到的阳性质粒的最低浓度为1.56×103 copies/μL,与商品化非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒进行对比,本研究的试验结果与商品化试剂盒的结果一致,说明本研究所建立的荧光定量PCR方法可用。综合以上结果,本研究成功建立ASFV VP72基因的普通PCR和荧光定量PCR的方法,增加了 ASF诊断方法的多样性,可用于猪场猪群的早期检测,以及在猪群的早期预警方面有着较大的优势。对制定非洲猪瘟的防控措施以及净化策略提供一定参考意义。