以非洲爪蟾(Xenopus laevis)蝌蚪为实验材料,应用免疫荧光、WesternBlot和qRT-PCR方法研究非洲爪蟾晶状体再生过程中Pax6与Six3的表达。免疫荧光结果表明,在晶状体再生过程中,手术后第3天,角膜愈合处变厚且Pax6表达;手术后第7天,再生出柱状细胞形成的囊状结构与角膜相连,此时Pax6在内外角膜和囊状结构处有表达,Six3在囊状结构和外角膜处表达;手术后第14天,晶状体开始纤维化,Pax6在外角膜处有表达,Six3在晶状体上皮和外角膜处有表达;手术后第21天,晶状体持续纤维化且开始透明;手术后第30天,晶状体结构再生基本完成,晶状体上皮处Pax6与Six3有表达。在晶状体摘除后不同时间Pax6与Six3在视网膜中都有表达,且表达位置稳定,Pax6表达位置主要在外网层,而Six3主要在节细胞层、内核层和外核层中表达。Western blot结果表明,与正常对照组相比,Pax6在晶状体摘除后3天、7天、21天、30天的表达差异极显著;Six3在晶状体摘除后0天、30天的表达差异显著,而3天、21天的表达差异极显著。qRT-PCR实验结果表明,Six3 mRNA在晶状体再生不同时期的表达,正常对照组与7天组Six3表达差异显著,而正常对照组与3天、14天、21天、30天组Six3表达差异极显著。以上实验通过组织学染色和荧光成像进一步证明了非洲爪蟾晶状体再生经历了角膜上皮细胞去分化、晶状体囊形成、晶状体纤维化过程,然后形成具有透明结构的晶状体。Western blot和qRT-PCR结果表明,Pax6和Six3与再生早期外角膜细胞转分化形成晶状体囊有关,与再生后期晶状体蛋白表达及细胞纤维化的调控有密切关联。本研究旨在揭示Pax6与Six3基因在非洲爪蟾晶状体再生过程中的表达,为两栖类晶状体再生提供理论依据。