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X盒结合蛋白1(X-box binding protein 1,XBP1)是一种具有碱性亮氨酸拉链结构的蛋白,属于CREB/ATF转录因子家族,它参与了内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)所引起的未折叠蛋白反应(Unfolded pro-tein response,UPR)。XBP1 有剪切型和非剪切型两种形式。非剪切型 XBP1(XBP1 unspliced,XBP1u)可由肌醇依赖性激酶 1a(Inositol requiring enzyme 1a,IRE1a)特异性地剪接XBP1u mRNA从而产生活化的剪切型XBP1(XBP1 spliced,XBP1s),XBP1s进一步调控下游基因,以维持内质网稳态。作为关键的转录因子,XBP1s参与许多生理病理过程,在生命体发育过程中发挥重要作用。XBP1基因敲除的小鼠由于胰腺外分泌功能缺陷死于胚胎时期,然其作用机理尚不清楚。本文以非洲爪蟾为模式动物,利用其胚胎量大、体外发育迅速易于操作的优势研究XBP1在胚胎早期胰腺发育中的作用机制。通过注射XBP1s MO(XBP1s morpholino)和 XBP1s mRNA 可实现对 XBP1s 的敲降和过表达,再通过qRT-PCR、Western blot、原位杂交、免疫组化等技术对胚胎进一步检测,发现敲降XBP1后胚胎发育早期内中外胚层受到影响,胚胎发育后期胰腺内外分泌细胞发育均受到影响,内分泌标志基因insulin和外分泌标识基因amylase的表达发生下调,而进一步发现胰腺祖细胞标志基因pdx1、p48、ngn3、sox9的表达也发生下调;过表达XBP1s的胚胎,胰腺标志基因insulin表达上调,提示XBP1s参与胰腺的发育。Foxa2是早期内胚层标识基因,也是胰腺内分泌标识基因pdx1上游主要的转录调控因子,与胰腺发育密切相关,与XBP1的作用类似。生物信息学分析显示XBP1s能够转录结合在foxa2的启动子区域。接着 ChIP(Chromatin Immunoprecipitations,染色质免疫共沉淀)和 Lu-ciferase(荧光素酶)实验检测到Foxa2启动子区有XBP1s的结合位点,提示XBP1s可能通过Foxa2影响胰腺发育。