论文部分内容阅读
目的:肺癌是世界范围内严重危害人类健康的恶性肿瘤之一,位居恶性肿瘤发病率及死亡率的首位。肺腺癌是肺癌最常见的病理类型,手术、放化疗及分子靶向治疗是最常用的治疗方式,耐药后复发转移是治疗失败的主要原因。肿瘤免疫治疗是目前肺癌治疗的新方向,针对免疫检查点的临床前期研究取得了突飞猛进的进展。然而,抑制性信号通路同时表达多个免疫抑制分子,仅部分患者表现短期获益。因此,寻找和确定新的免疫检查点分子对肿瘤的免疫治疗尤为重要。半乳糖凝集素1（Galectin-1,Gal-1）作为新发现的免疫抑制分子,得到了国内外学者广泛地关注。研究证实Gal-1参与了包括肺癌在内的多种恶性肿瘤的发生发展,Gal-1抑制剂在恶性肿瘤的治疗中发挥着重要作用,很有可能成为肿瘤免疫治疗的新靶点。临床上对肿瘤Gal-1表达检测一般采用取活检标本进行免疫组织化学染色的方法。虽然病理活检是评价Gal-1表达的金标准,但是这种有创性的检查不能作为常规检查多次进行,活检的局部情况也不能反映肿瘤的整体。18F-FDG PET/CT显像作为一种无创性的影像学工具,可以反映多种生物标记物如EGFR、VEGF、Ki-67、PD-L1等的表达,但其能否反映Gal-1的表达目前尚不明确。本研究旨在研究Gal-1与PET代谢参数、糖酵解途径关键因子或酶以及免疫相关因子的相关性,探讨Gal-1与糖代谢、免疫逃逸的关系及其预后价值。研究方法:1.回顾性分析2010年6月至2018年8月于大连医科大学附属第一医院核医学科术前行18F-FDG PET/CT显像并经手术病理证实为肺腺癌的患者151例。收集患者的临床病理资料,包括年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移、临床分期。利用免疫组织化学染色检测Gal-1蛋白在肺腺癌患者原发灶中的表达。应用SPSS 22.0软件进行统计学分析。分析Gal-1表达与18F-FDG PET/CT显像中常用的半定量指标如最大标准摄取值(maximum standard uptake value,SUVmax)、肿瘤代谢体积（metabolic tumor volume,MTV）和病灶糖酵解总量（total lesion glycolysis,TLG）及临床病理因素的相关性,来探讨肺腺癌Gal-1表达与糖代谢的关系。采用Logistics回归分析影响Gal-1表达的预测因素,受试者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）计算SUVmax的最佳阈值。2.对上述151例患者石蜡标本进行免疫组织化学染色,检测糖酵解途径关键因子或酶如葡萄糖转运蛋白1（glucose transporter 1,GLUT1）、己糖激酶（hexokinaseⅡ,HKⅡ）、磷酸果糖激酶（phosphofructo-kinase,PFK）、醛缩酶A（aldolase,ALDOA）、丙酮酸激酶（pyruvate kinase,PKM2）、乳酸脱氢酶A（lactate dehydrogenase,LDHA）以及免疫相关因子如CD4、CD8、叉头状核转录因子（forkhead box protein 3,FOXP3）、CD68的表达。Spearman相关分析及多因素回归分析其与Gal-1表达的相关性。3.对2010年6月至2015年10月的96例患者进行随访,探讨Gal-1表达在肺腺癌患者术后预测预后中的价值。观察的预后指标包括:无进展生存时间（PFS）及总生存时间（OS）。生存分析采用Kaplan-Meier曲线,Log-rank检验及Cox比例风险模型。结果:1.根据免疫组织化学染色Gal-1表达评分界值,将151例患者分为表达阳性组70例和表达阴性组81例。表达阳性组原发灶大小大于表达阴性组（Z=-3.929,P=0.000）,SUVmax、MTV及TLG值高于表达阴性组（Z=-9.531,P=0.000;Z=-9.087,P=0.000;Z=-9.233,P=0.000）,Gal-1在有淋巴结转移组、中晚期组及中低分化组表达率高于相应组别（χ2=45.542,P=0.000;χ2=31.736,P=0.000;χ2=25.546,P=0.000）。原发灶SUVmax、MTV以及TLG与Gal-1表达评分均呈显著正相关（r=0.716,P=0.000;r=0.689,P=0.000;r=0.702,P=0.000）。多因素Logistics回归分析原发灶SUVmax是Gal-1表达的独立预测因素（P=0.000）,ROC分析以SUVmax=5.1为界值,灵敏度为97.1%,特异度为87.7%,曲线下面积（area under the curve,AUC）为0.950。2、根据免疫组化评分界值,将151例患者分为GLUT1表达阳性组75例和GLUT1表达阴性组76例,HKⅡ表达阳性组68例和HKⅡ表达阴性组83例,PFKL表达阳性组65例和PFKL表达阴性组86例,ALDOA表达阳性组73例和ALDOA表达阴性组78例,PKM2表达阳性组65例和PKM2表达阴性组86例,LDHA表达阳性组62例和LDHA表达阴性组89例;在肿瘤实质及间质中均有CD8+T细胞和CD68+肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages,TAMs）的浸润表达,CD4+T细胞和FOXP3+调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）主要浸润表达在肿瘤间质中;Spearman相关分析结果显示Gal-1表达评分与GLUT1、HKⅡ、PFKL、ALDOA、PKM2、LDHA、FOXP3及CD68评分均呈正相关（r=0.657,P=0.000;r=0.661,P=0.000;r=0.570,P=0.000;r=0.301,P=0.000;r=0.546,P=0.000;r=0.292,P=0.000;r=0.368,P=0.000;r=0.355,P=0.000）,与CD8评分呈负相关（r=-0.349,P=0.000）,与CD4评分无相关性;多因素回归分析结果显示仅GLUT1、HKⅡ、PFKL和CD8有统计学意义（t=4.526,P=0.000;t=4.206,P=0.000;t=4.561,P=0.000;t=-4.251,P=0.000）。3.术后复发33例,20例死亡。根据免疫组化评分界值,将96例患者分为Gal-1表达阳性组42例和Gal-1表达阴性组54例,表达阳性组PFS和OS时间均低于表达阴性组（χ2=38.690,P=0.000;χ2=14.096,P=0.000）;以SUVmax中位数5.0为界,分为高代谢组（n=49）和低代谢组（n=47）,以MTV中位数2.0为界,分为高代谢组（n=47）和低代谢组（n=49）,以TLG中位数7.2为界,分为高代谢组（n=48）和低代谢组（n=48）,高代谢组PFS和OS时间均低于低表达组（χ2=26.080,P=0.000,χ2=8.261,P=0.004;χ2=21.297,P=0.000,χ2=6.958,P=0.008;χ2=24.181,P=0.000,χ2=6.448,P=0.011）;男性组（χ2=5.215,P=0.022）、淋巴结转移组（χ2=24.051,P=0.000）、中晚期组（χ2=32.870,P=0.000）OS时间分别低于女性组、无淋巴结转移组及早期组;中低分化组（χ2=13.860,P=0.000）、淋巴结转移组（χ2=33.349,P=0.000）、中晚期组（χ2=38.915,P=0.000）PFS时间分别低于相应组别;多因素分析显示Gal-1表达及临床分期是PFS的独立预测因子（P=0.000,P=0.001）,原发灶SUVmax及临床分期是OS的独立预测因子（P=0.024,P=0.000）。结论:肺腺癌Gal-1表达阳性组较表达阴性组有更高的FDG摄取,SUVmax是Gal-1表达的独立预测因子;Gal-1表达与糖酵解通路上的关键因子或酶GLUT1、HKⅡ、PFKL、ALDOA、PKM2、LDHA以及免疫相关因子FOXP3、CD68均呈显著正相关,与CD8呈显著负相关;Gal-1是预测肺腺癌PFS的独立预后因子,SUVmax是预测OS的独立预后因子。