输入蛋白8促进人牙髓细胞白介素6表达的体外研究

来源 :滨州医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wenruozhu
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目的:输入蛋白8(Importin 8 IPO8)是对成熟mRNA细胞核质运输有重要调节作用的一种核质转运蛋白。前期的体内研究表明,IPO8在人炎性牙髓组织中的表达显著增加,表明IPO8参与牙髓炎症的发生,但机制仍不清楚,本研究通过在体外用脂多糖(Lipopolysaccharide LP S)刺激人牙髓细胞模拟牙髓炎症的状态,观察炎性细胞因子白介素-6(Interleukin IL-6)的表达情况来探讨IPO8在人牙髓细胞炎症发生中的作用及其具体的机制。方法:体外培养人牙髓细胞(Human dental pulp cells HDPs),根据刺激因素的不同,分为 LPS+HDPs 组、LPS+HDPs+0.01ug/ml IPO8 组、LPS+HDPs+0.015ug/m 1IPO8组、LPS+HDPs+0.02ug/mlIPO8组和正常HDPs组,施加刺激因素后观察12H和24H,分别用实时荧光定量聚合酶链反应(Realtime-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HDPs中IL-6的表达,探讨外源性IPO8对HDPs中IL-6表达的影响,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测LPS+HDPs组中IPO8的表达,探讨在 HDPs 中 IPO8 的表达,小干扰 RNA(small interfering RNA siRNA)沉默IPO8,用Real time-PCR、ELISA检测HDPs中IL-6的表达,探讨沉默IPO8后对HDPs中IL-6表达的影响。结果:Real-time PCR、ELISA、Western blot 结果表明 LPS+ HDPs 组 IL-6 基因、蛋白和IPO8蛋白的表达较正常HDPs组均增加且有显著性差异(*P<0.05),外源性IPO8刺激LPS诱导的HDPs可以进一步上调IL-6基因和蛋白的表达且有显著性差异(*P<0.05),沉默IPO8可使HDPs中IL-6基因和蛋白的表达下调且有显著性差异(*P<0.05)。结论:IPO8参与调控人牙髓细胞的炎症,促进人牙髓细胞IL-6的表达。
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