肿瘤微环境是指肿瘤发生及恶性演进过程中与宿主相互作用所形成的肿瘤局部环境,肿瘤微环境具有特异激活的细胞信号通路,例如:NF-κB、STAT3等,并诱导各种促炎性细胞因子、趋化因子和血管生成因子的表达,促进血管生成、肿瘤生长、侵袭和转移。肿瘤独特的微环境不仅影响免疫细胞的功能,而且还会在肿瘤部位募集更多的炎症细胞以增强炎症作用。二者相互促进,形成恶性循环并加速肿瘤的发展。本研究首先利用肿瘤细胞无法通过的3μm孔径大小的Transwell小室构建细胞共培养模型,此共培养模型能够简化肿瘤在生物体内与周围细胞间进行能量代谢和物质交换的环境,模拟体内肿瘤赖以生存的肿瘤微环境。之后以该共培养模型为基础进行一系列实验,首先检测大鼠成骨细胞与宫颈癌细胞Si Ha在共培养后大鼠成骨细胞的形态学变化以及增殖速率情况。在共培养后大鼠成骨细胞与单独培养时相比细胞形态发生了间质表型改变,并且增殖速率和迁移能力有显著上升,同时在乳腺癌细胞系MCF-7中也发现类似的现象。为了检测共培养体系细胞互作对于肿瘤细胞表型的影响,本课题检测了肿瘤细胞在共培养之后的表型变化,结果发现,肿瘤细胞在与大鼠成骨细胞共培养后,肿瘤细胞的增殖速率显著上升,而且这种细胞间的互作与两种细胞之间的比例无关。为了确定E6蛋白与P53蛋白在肿瘤微环境重塑中的作用,设计了同时携带PTD结构域和E6结合基序的靶向E6的小分子融合蛋白,并进行了体外诱导表达和纯化,结果显示该融合蛋白能够在大肠杆菌中表达,而其纯化尚需进一步优化。综上所述,肿瘤细胞会通过分泌特定物质影响周围细胞的表型从而改造肿瘤微环境,而被改造的肿瘤微环境会通过肿瘤细胞的分泌功能反作用于肿瘤细胞,导致其生长和增殖的增强。