白花丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge f.alba Wu and Li)是唇形科(Labiatae)植物丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)的白花变型,主要产于山东莱芜、章丘等山区地带,是我国应用最早、最广泛的传统中药之一。临床上,白花丹参常用作丹参使用,主要用于治疗冠心病、心绞痛、高血脂、高血压等心脑血管疾病。另外,白花丹参对治疗血栓闭塞性脉管炎有奇效,在民间已有百余年的历史。现代研究表明,白花丹参与丹参在化学成分基本一致,主要含有脂溶性丹参酮类成分和水溶性酚酸类成分。其中丹酚酸A是白花丹参中一种重要的酚酸类成分,它在白花丹参药材中的含量极低,但是其药理活性比较好,具有较高的药用价值和广阔的开发应用前景。本课题组在前期的工作中,已经获得一种制备丹酚酸A高含量药材的方法,本文是在该方法的基础之上,对处理后的药材中丹酚酸A成分进行提取分离纯化。首先,采用超声波对该药材进行乙醇提取,经萃取、酸化等步骤后得到丹酚酸A的醇提物。然后我们采用聚酰胺树脂对醇提物中的丹酚酸A进行纯化,结果显示聚酰胺树脂纯化丹酚酸A的最佳工艺条件为:上样液质量浓度为11 g/L,体积流量为1.0 mL/min,上样量为150 mL,20%乙醇水溶液洗脱5个保留体积除杂,洗脱溶剂为50%乙醇水溶液,洗脱体积为10个保留体积,纯化后丹酚酸A含量达40.36%;其次,使用MCI树脂对其继续进行纯化,结果显示,250 mL的MCI树脂上样量为7 g,30%甲醇水溶液洗脱20个保留体积除杂,40%甲醇水溶液洗脱,洗脱至第9-12个保留体积出现大量的丹酚酸A,纯度在65%左右;最后,再经过Sephadex LH-20、C18反相硅胶柱色谱纯化后,丹酚酸A的纯度达到97%以上。同时对高纯度丹酚酸A进行制备,为后续研究提供样品。由于丹酚酸A的水溶性较差,为了增加它在水中的溶解度,将其制成丹酚酸铵盐,并且考察了制备过程中待滴加氨水的pH值、反应终点的反应液pH值对丹酚酸A铵盐生成的影响,结果显示,待滴加氨水溶液的pH值为9.5,反应液pH值为7.5时,丹酚酸A铵盐含量在95%以上。考察了制得的丹酚酸A铵盐在水中的溶解度,结果显示,其溶解度在40 mg/mL以上,具有较好的水溶解度。对处理后白花丹参的丹酚酸A醇提物进行了抗炎活性的初步评价,结果显示该提取物能够明显地抑制LPS诱导的THP-1细胞分泌的炎症因子IL-8及IL-1β的过表达,表明具有较好的抗炎活性;采用DPPH法、还原测定法以及羟基自由基清除实验,对聚酰胺柱色谱纯化后的丹酚酸A产物进行了抗氧化活性研究,结果显示该纯化产物具有较好的抗氧化活性。采用四氯化碳橄榄油溶液诱导大鼠肝纤维化,以复方鳖甲软肝片灌胃为阳性对照,以尾静脉注射的给药方式对制得的丹酚酸A铵盐进行抗肝纤维化的研究。通过观察大鼠的体征变化、肝组织病理切片变化、α-SMA免疫组学分析,采用化学法检测大鼠血清中AST、ALT水平及肝组织匀浆中MDA、SOD水平,以ELISA法检测血清中LN的含量,初步评价丹酚酸A铵盐的抗肝纤维化作用。结果表明,丹酚酸A的铵盐对患病大鼠的体征具有改善作用,能够减轻肝组织的纤维化程度,抑制肝组织中α-SMA的过表达,并且能显著降低肝纤维化大鼠血清中AST、ALT、LN的水平,升高肝组织匀浆中SOD的含量,降低脂质过氧化物的降解产物MDA的水平。以上实验结果表明丹酚酸A铵盐对大鼠肝纤维化具有一定的治疗,为丹酚酸A的进一步开发应用提供参考。