研究背景：流行病学调查显示，长期服用非甾体类抗炎药NSAIDs人群中结肠癌发病率明显下降，推测与NSAIDs抑制环氧化酶(COX)活性导致前列腺素合成减少有关。COX有两种亚型，结构型COX-1及诱导型COX-2。在结肠癌动物模型中，长时间加用NSAIDs可明显降低结肠肿瘤发生率；APC突变小鼠多发性结肠腺瘤模型的COX-2基因被敲除后，后代发生结肠腺瘤的数目减少50％，使用COX-2特异性抑制剂也取得相似的结果。Sheng等用western blots和免疫组化法发现COX-2选择性抑制剂sc-58125治疗已植入结肠肿瘤细胞HCA-7(持续高表达COX-2蛋白)的裸鼠，可使肿瘤生成率降低85～90％。Lee等的研究显示，COX-2蛋白水平可影响PGE2产物，而PGE2可抑制NK、LAK、细胞毒细胞的活性，抑制IL-2的产生，降低IL-2受体和IFN-r受体的表达，故抑制COX-2酶活性可导致前列腺素减少而具有逆转肿瘤的免疫抑制作用。临床实验表明长期服用苏林酸可以使FAP患者结肠息肉体积明显缩小，数量减少。 研究COX-2在大肠癌发病机制中的作用同时也有相关研究提示在低分化腺癌中COX-2免疫染色常为不均一性，而在高分化腺癌中则表现为均一性，提示COX-2表达水平增高与肿瘤分化水平有一定联系。因此，COX-2在结肠上皮的表达水平高低将可成为结肠癌预后判断的标记物。本研究希望通过观察比较不同分化程度，不同阶段的大肠肿瘤(包括大肠腺瘤，大肠癌TNM各期)COX-2的表达水平的差异，研究COX-2表达水平与大肠肿瘤分化、分期、转移及预后等的关系，以期为大肠癌TNM分期的判断及估计预后提供新的依据，为大肠肿瘤 浙江大学研咒主论义综合治疗提供新的参考，寻找一条预防及治疗大肠癌的新途径。 实验方法：本研究利用免疫组织化学染色方法对浙江大学附属第二医院1999～2002年117例大肠肿瘤进行COX－2表达水平的观测。117例中53O／O为男性，平均年龄56．50岁，大肠腺瘤（n＝ZI）；大肠癌96例：I期（n＝19）：11期（n＝23）：111期（n＝38）；W期（n二16），42．7％肿瘤有淋巴结转移，13．7％有远处转移，所有病例均以手术切除肿瘤。免疫组织化学染色方法的主要步骤为石蜡包埋；脱蜡；水化；组织抗原EDTA热修复；内源性过氧化酶阻断剂；正常免疫动物血清；COX－2一抗（稀释浓度1：200）；二抗；链霉菌抗生物素蛋白－过氧化酶；DAB染色；苏木素复染。结果观察：染色阳性信号为棕黄色颗粒，综合染色强度和阳性细胞数分级，取表达最强的部位，按着色程度分级：基本未着色，染色与背景相似为0分；着色浅，略高于背景为1分：中度着色，明显高于背景为2分；强染，着色深棕色为3分：按阳性细胞数分级：（10％为0分；10～50％为1分；50～75o／o为2分；）75％为3分。前两项得分相加后分四级：0—l分为（－）；2分为（十）：3～4分为（＋＋＼sed分为（＋＋十）。标本染色检测以两位观察员盲法观察，分别记录，同时记录染色位置。结果以SPSS10．0统计学分析软件进行分析，COX－2与各临床、病理指标的关系以 Kendall tb correlation分析，依据与 COX－2表达水平具有相关性的临床病理指标进行分组，各组结果之间差异以X‘检验分析。 结果：二0儿2染色主要为肿瘤上皮细胞（主要为胞浆染色）。在血管内皮细胞，炎症单核细胞，成纤维细胞亦有染色，但染色程度不及肿瘤上皮细胞。96例大肠癌COX—2阳性率为95％。21例大肠腺瘤COX—2阳性率为43％。此外，13例肿瘤旁正常组织标本中 COX－2染色基本为阴性。经 Kendall tb correlation进行相关性分析，大肠肿瘤COX—2表达水平与组织性质、最大肿瘤直径、TNM分期、淋巴结转移、远处转移相关…＜0．肪）与年龄、性别、肿瘤位置、肿瘤分化水平、病理类型等无明显相关（p＞o．帖人依据与＊0儿2表达水平具有相关性的临床病理指标进行分组，分组后观察到：（l）大肠腺瘤、大肠癌、癌旁正常大肠组织之间COX工表达水平有显著差异（p＜0．ofhu）最大肿瘤直径小等于SCC与大于 SCCI之问 COX《表达水平有显著差异（p＜0．05h（3）不同 TN卜！分期阶段大肠癌＊＊x一2表达水平有显著差异（p＜0．01人 O）有淋巴结转移与无淋巴结转 浙江大学研兜主论文移之间，＊OX一2表达水平有显著差异（p＜0．01）；6）有远处转移与无远处转移之间＊＊x一2表达水平有显著差异（p＜0．01人（6）同时有淋巴结转移及远处转移与只有单纯淋巳结转移COX—2表达水平有显著差异（p＜0．of）；0COX毛表达高的肿瘤处于TNM分期＊、IV期的可能性比COX－2表达低者大。 结论：性质为癌症、最大肿瘤直径大，淋巴结转移，远处转移，TNM病期晚，COX2表达水平高：＊0义2可以作为一项判断大肠癌＊＊M分期的新的辅助指标；可以帮助提示术前诊断及帮助选择更合适的手术方式和更合理的综合治疗方案。