“扶正清热通淋”汤通过调节NLRP3炎症小体通路对大鼠复杂性尿路感染作用的研究

来源 :西南医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sd2009shandong
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目的:探讨“扶正清热通淋”汤能否通过调节NOD样受体蛋白3(Nod-like receptor pyrin domain3,NLRP3)炎症小体改善耐药大肠杆菌所致大鼠复杂性尿路感染对泌尿系统的损害,并探讨该汤剂联合左氧氟沙星治疗耐药菌所致复杂尿路感染的可行性。方法:将SPF级雌性SD大鼠50只随机分为五组:空白组,模型组,左氧氟沙星组(西药组),左氧氟沙星+扶正清热通淋汤组(中西组),扶正清热通淋汤组(中药组)。实验中观察各组大鼠一般情况;实验完成后,取尿液做细菌培养以判断各组大鼠尿路感染情况;HE染色观察大鼠肾脏及膀胱组织病理改变情况;免疫组化检测NLRP3在肾脏及膀胱组织中表达情况;Elisa检测大鼠血清中IL-1β及IL-18表达情况;Western blotting检测NLRP3、ASC、Caspase-1表达情况。结果:1.在实验过程中,空白组大鼠表现为反应迅速,精神良好,饮食正常,活动情况正常,毛发浓密柔顺伴有光泽,该组敷垫相对清洁干燥,尿液气味正常。模型组大鼠表现为精神萎靡,进食及活动减少,毛发蓬松且无光泽,体重稍减轻或增长不明显,出现尿频等症状,敷垫明显湿润,尿液气味刺鼻。各治疗组大鼠的反应、精神、饮食、活动等较模型组有所改善,其中中西组改善最为明显。2.空白组尿液细菌培养阳性率为(0),模型组尿液细菌培养阳性率为(100%);中西组尿液细菌培养阳性率为37.50%,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。3.模型组肾脏及膀胱组织HE染色可见大量炎症细胞,西药组及中药组肾脏及膀胱组织与模型组比较炎症细胞数量明显减少;中西组中肾脏及膀胱组织中炎症细胞数量及组织结构变化与空白组接近。大鼠肾脏及膀胱组织病理学评分:空白组与模型组比较评分差异有统计学意义(P<0.0001);中西组与模型组比较评分差异有统计学意义(P<0.001)。4.大鼠肾脏及膀胱组织的NLRP3免疫组化结果显示:光镜下见空白组肾脏及膀胱组织的NLRP3蛋白轻度黄染,模型组的组织细胞黄染程度最深。三组用药组黄染程度较模型组不同程度降低。中西组和中药组的肾脏及膀胱组织的NLRP3免疫组化与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.001)。在膀胱组织中的NLRP3表达水平,西药组和中药组与中西组比较差异有统计学意义(P<0.05)。5.Elisa检测西药组、中药组和中西组血清中的IL-1β和IL-18水平较模型组明显降低(P<0.001)。其中中西组的IL-1β和IL-18较西药组和中药组明显降低,且差异有统计学意义(P<0.05)。6.Western blotting检测西药组、中药组和中西组的NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达较模型组明显降低(P<0.001)。中西组的NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达较西药组和中药组明显降低,且与两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:1.“扶正清热通淋”方能通过调节NLRP3炎症小体通路对复杂性尿路感染造成的肾脏和膀胱组织损伤起到保护作用。2.“扶正清热通淋”方联合左氧氟沙星对耐药大肠杆菌所致的复杂性尿路感染有较好的疗效。
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