即时检测（Point-of-care testing,POCT）是一种快速检测技术,可以在采样现场直接对样品进行检测分析,具有小型、快速、简易、即时等优点。可视化检测由于无需大型仪器可直接利用裸眼观测实验结果,在即时检测中得到了广泛的发展及应用。传统的可视化方法仍需要一定的专业人员操作,要实现真正的POCT仍具有很大的挑战。试纸条为可视化方法的发展提供了便携、可靠的工具,在疾病诊断、环境监测、食品安全等方面得到广泛的应用。将核酸探针与试纸条进行结合构建的生物传感,为疾病标志物的诊断提供了低成本、便捷的检测方法。本论文以试纸条为检测工具,构建了可视化即时检测疾病标志物的新方法。主要研究内容为以下两个方面:一、可视化检测端粒酶活性的即时检测法研究端粒酶活性的即时检测对于癌症的早期诊断至关重要。本研究工作以过氧化氢试纸条为检测工具,建立了可视化检测端粒酶活性的POCT法。首先,通过链霉亲和素-生物素反应将生物素化的端粒DNA引物（TS）固定在磁珠（MBs）表面,形成MB-TS复合物。然后,将TS通过端粒酶延长形成包含多个TTAGGG重复单元的端粒DNA延长产物（TEP）。原位形成的MB-TEP复合物与葡萄糖氧化酶修饰的cDNA（GOD-cDNA）特异性杂交。通过磁分离后,将MB-TEP/GOD-cDNA复合物与葡萄糖底物孵育原位产生过氧化氢（H2O2）,利用过氧化氢试纸条的颜色变化实现可视化检测。由于一条TEP长链可与多条GOD-cDNA杂交,可富集GOD实现高效催化葡萄糖产生过氧化氢,以此可靠、灵敏检测端粒酶活性。肉眼观察到的检出限（LOD）低至10 HeLa cells/μL,吸光度测量可检测到4.5 HeLa cells/μL。因此,该方法为可视化检测端粒酶活性提供了一种灵敏且低成本的方法,这也拓展了商品化过氧化氢试纸条在非H2O2目标物生物传感中的应用。二、胶体金核酸侧向层析试纸条研制侧向层析技术具有便携、检测快速、价廉等优点,在许多领域得到了广泛应用。胶体金由于具有颜色明显、价格低廉、易合成、稳定性好、易修饰等优点,在侧向层析中常作为信号分子。本研究工作利用核酸作为识别探针,研制胶体金侧向层析试纸条。对影响试纸条检测性能的基本参数进行了考察,并通过核酸杂交以及核酸适配体与小分子的识别初步验证组装试纸条的性能。实验结果表明,组装的核酸侧向层析试纸条可实现核酸与农药的可视化检测,但灵敏度有限,性能有待继续提高。