脱氧雪腐镰刀菌烯醇对小鼠血清指标及小肠机械屏障的影响

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脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON),属单端孢霉烯族类毒素。本试验选择4周龄,体重为18~22 g的SPF级昆明小鼠80只,随机分为4组,试验1、2、3 组分别灌服浓度为 1.0 mg/kg BW、1.5 mg/kg BW 和 2.5 mg/kg BW DON 21 d,对照组灌服等量的生理盐水。采用ELISA方法,研究了 DON对血清、小肠抗体水平和抗氧化功能的影响,并采用HE染色、免疫组化和Real-time qPCR方法研究了 DON对小肠显微结构、肠上皮紧密连接相关蛋白mRNA以及PCNA蛋白表达的影响。试验结果表明:随着DON灌服水平的升高,中剂量与高剂量组小鼠的平均日增重和日采食量与对照组相比显著降低(P<0.05),低剂量组差异不显著(P>0.05)。中剂量组血清IgA水平升高显著(P<0.05),而高剂量组升高极为显著(P<0.01)。高剂量组血清IgG水平显著升高(P<0.05)。高剂量组十二指肠sIgA水平显著低于对照组(P<0.05)。各组空肠sIgA水平差异不显著(P>0.05)。在回肠中,sIgA水平随DON浓度的升高而降低,中剂量组显著低于对照组(P<0.05),高剂量组极显著低于对照组(P<0.01)。不同水平DON均使血清中T-AOC和SOD的活性降低。各试验组T-AOC活性显著降低(P<0.05),高剂量组极显著降低(P<0.01);高剂量组SOD活性降低显著(P<0.05);各试验组GSH-Px和MDA活性与对照组比较变化均不显著(P>0.05)。高剂量组各个肠段的T-AOC和GSH-Px水平均显著降低(P<0.05)。中剂量的DON显著降低了空肠、回肠GSH-Px活性(P<0.05)。灌胃高剂量的DON,显著降低了SOD活性(P<0.05);中剂量组十二指肠、回肠的SOD活性显著降低(P<0.05);低剂量组回肠SOD活性显著降低(P<0.05)。试验组DON均显著升高了十二指肠的MDA活性(P<0.05)。高剂量的DON使空肠的MDA活性显著升高(P<0.05)。由此可知:DON降低小鼠机体的免疫功能和肠道抗氧化性能,且具有剂量依赖性。对照组小肠结构完整,绒毛长度与各试验组相比较长,排列紧密;低剂量组有较轻损伤,部分绒毛破损脱落;中、高剂量组绒毛明显断裂,绒毛长度变短变细,回肠损伤最为明显。低剂量组三段小肠中Claudin-1 mRNA表达量差异不显著(P>0.05),中剂量组十二指肠和空肠中的表达差异显著(P<0.05)、回肠中的表达差异极显著(P<0.01),高剂量组中差异极显著(P<0.01);β-catenin基因mRNA表达量表现为低剂量组中十二指肠差异不显著(P>0.05)、空肠差异显著(P<0.05)、回肠差异极显著(P<0.01),中、高剂量组中十二指肠差异不显著(P>0.05)、空肠和回肠差异极显著(P<0.01);低剂量组的Occludin基因mRNA在各个肠段表达量差异均不显著(P>0.05),中剂量组差异显著降低(P<0.05),高剂量组差异极显著降低(P<0.01)。试验组三段小肠PCNA阳性反应强度降低,IOD值均显著降低(P<0.01)。由此可知:DON通过抑制小鼠小肠中PCNA蛋白和Occludin、Claudin-1、β-catenin mRNA表达,损伤小肠上皮细胞机械屏障,抑制了屏障功能的修复。
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