近几年随着生物制药规模逐渐增大,下游的蛋白分离纯化面临严峻挑战,能否实现快速高效分离纯化生物大分子是制约生物制品产量的关键因素。阳离子交换层析作为高效的分离纯化技术之一,被广泛用于生物制品的下游纯化工艺中,琼脂糖凝胶是传统的离子交换纯化介质常用的基质,它具有很好的生物适应性,但由于其质地较软、耐受压力低、介质平均孔径小等因素,使得该类介质在快速分离方面的应用受到一定限制。大孔聚丙烯酸酯类微球具有机械强度高、孔径尺寸大的特点,有利于实现蛋白快速分离,本课题基于该基质,建立了三种制备阳离子交换介质的方法,对影响介质性能的反应因素进行了实验探究,得到如下结论:1)通过多步反应在微球表面偶联Na₂S₂O₅的方法,制备得到带有磺酸基的强阳离子交换层析介质。通过电子扫描显微镜和光学显微镜对微球进行形貌表征,其球形度良好,粒径较为均一,平均粒径约30μm,孔径大小在100～1000 nm,比表面积控制在40～100 m²/g;介质配基密度可控范围:0.126～0.370 mmol/m L wet gel,以溶菌酶为探针分子,测得静态蛋白结合载量范围为:37.0～81.0 mg/m L,其动态蛋白结合载量达到37.7 mg/m L;并发现随着介质偶联配基密度的增大其静态载量和动态载量均增大。2)初步制备得到了结构完整的溴含量在2.31～4.62 mmol/g的微球,研究发现引发剂增多会导致微球孔径减小;随二元致孔剂中良溶剂比例的减少,所得微球孔径逐渐增加,其孔径可调范围为100～2000nm;微球表面含有溴基团,通过表面引发原子转移自由基聚合法,将甲基丙烯磺酸钠单体接枝到微球上得到了强阳离子交换层析介质,离子交换容量随着微球表面溴含量增加而增大,以溶菌酶分子为探针测定介质的静态蛋白结合载量,发现其数值随着离子交换容量的增加而增大,离子交换容量可调范围为0.123～0.233 mmol/m L,溶菌酶的静态载量为38.1～100.6 mg/m L。3)利用铈（IV）氧化还原引发亚氨基二乙酸改性的甲基丙烯酸缩水甘油酯单体在微球表面发生接枝聚合,聚合制备了一种弱阳离子交换层析介质,考察了影响离子交换容量的部分因素,分析了离子交换容量与静态蛋白结合载量之间的关系,以溶菌酶为探针测定介质的静态结合载量,静态结合载量随着离子交换容量的增加而增大;介质的离子交换容量可调范围为0.055～0.281 mmol/m L,对应其静态蛋白结合载量为20.5～130.1 mg/m L。