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背景:由病原菌（Pathogen）感染引起的疾病在临床上很常见,往往是由多种病原菌（Multiple pathogens）感染导致的。中药（Traditional Chinese Medicine,TCM）在其治疗使用上,历史悠久,并且TCM中的天然成分,相对化学药物毒性较小,不良反应相对较弱。中药复方（Chinese Medicine Compound,CMC）是指处方中含有两种或两种以上单味中药组成的方剂,具有多成分、多功效、多靶点的特点,能弥补单味中药治疗疾病的不足,能满足临床上复杂病情的需要。目前,由抑制病原菌效果显著的中药复方产品,如洁尔阴、黄柏抗菌护理液,已成为市场上的畅销药品,但其作用机制不清楚,对产品的扩大使用也存在局限,因此,明确中药复方的作用机制非常重要。目的:本课题以39种中药为研究对象,筛选出对金黄色葡萄球菌（S.aureus）、白色念珠菌（C.albicans）、大肠杆菌（E.coli）有明显抑制作用的中药,组成最佳抑菌复方（Chinese Medicine Compound Bacteriostatic liquid,CMCB）,阐释其抑菌机制,探究其物质基础。方法:通过微量法测定最低抑菌浓度（Minimum Inhibitory Concentration,MIC）和最低杀菌浓度（Minimum Bactericidal Concentration,MBC）,筛选抑制活性较好的中药提取物;按照正交设计法,筛选出最佳的复方。初步评价其提取物抑制微生物生长的能力。同时测定复方抑菌液对S.aureus、E.coli、C.albicans的抑菌曲线。然后考察S.aureus和E.coli、AKP酶、可溶性蛋白,DNA和RNA含量的影响。以及对C.albicans ROS的含量、生物被膜、细胞壁、细胞膜、菌丝形成,及对DNA和RNA含量的影响。最后通过HPLC和LC-MS分析中药复方抑菌液（Chinese Medicine Compound Bacteriostatic liquid,CMCB）中潜在的抑菌成分。结果:1、从39种中药提取物中筛选得到了大黄、黄连、黄芩、鱼腥草、栀子5种抑菌活性较好的提取物,该5种中药组成的中药复方抑菌液（CMCB）质量组成比例为大黄:黄芩:黄连:鱼腥草:栀子=2:1:1:1:1时,抑菌效果最好。2、CMCB对金葡菌、大肠杆菌抑制作用明显,最低和最高抑制浓度分别为0.49mg/mL和4.41 mg/mL。CMCB能够导致金黄色葡萄球菌、大肠杆菌AKP酶和可溶性蛋白含量的增加,降低DNA和RNA含量。在8 h内,两种菌AKP酶的含量随时间延长而增加,CMCB浓度与AKP酶含量成正相关。在10 h内,两种菌培养液中可溶性蛋白的含量呈现8 h内AKP酶的类似趋势。在CMCB浓度为0.49 mg/mL和4.41 mg/mL时,两种菌DNA和RNA含量分别最高和最低,远远低于空白组。在第8 h时,DNA和RNA的含量有上升趋势。0.49-4.41 mg/mL CMCB在6 h内能显著抑制三种菌的生长;6-12 h内,三种菌的生长随着CMCB浓度的增加而变慢,但都比空白组低。3、三种浓度CMCB（0.49-4.41mg/mL）能增加白色念珠菌悬浮液中ROS的浓度。0.49 mg/mL和4.41 mg/mL CMCB能分别抑制白色念珠菌生物被膜中ROS的产生,增加白色念珠菌生物被膜中ROS量。CMCB能抑制不同生长阶段白色念珠菌生物被膜的产生,其抑制效果洁尔阴和黄柏抗菌护理液效果好;在对白色念珠菌生物被膜形成的抑制效果中,比洁尔阴效果好,比黄柏抗菌护理液略差。在对白色念珠菌EPS测定中,CMCB能有效抑制EPS产生,浓度高对EPS抑制效果更好。相比洁尔阴和黄柏抗菌护理液,CMCB效果略差。在白色念珠菌粘附力的测定中,0.49-4.41 mg/mL CMCB能有效减轻白色念珠菌对96孔板的粘附,其效果比洁尔阴和黄柏抗菌护理液好。4、CMCB能破坏白色念珠菌细胞壁。通过对白色念珠菌几丁质酶的分析,山梨醇实验、可溶性蛋白的测定,发现CMCB能使几丁质酶含量增加,培养液中可溶性蛋白含量增加,能提高菌细胞膜表面的疏水性和通透性发挥抑制作用。加入山梨醇,白色念珠菌的浓度比空白组高。在对白色念珠菌细胞膜的影响实验中,中高浓度的CMCB能够提高细胞膜表面的疏水性;其他浓度均提高膜的通透性。5、CMCB对白色念珠菌毒力因子的实验中,1.47 mg/mL和4.41 mg/mL CMCB能抑制白色念珠菌菌丝的形成。在CMCB对白色念珠菌核酸含量的测定中,0.49-4.41mg/mL CMCB作用下,核酸含量明显低于空白组。结论:中药复方抑菌液（CMCB）能够有效的抑制三种菌的正常生长和降低DNA/RNA的含量。CMCB能够导致金黄色葡萄球菌和大肠杆菌AKP酶活性的升高,培养液中可溶性蛋白浓度增加。CMCB能够影响白色念珠菌悬液和生物被膜中ROS的含量,抑制白色念珠菌生物被膜的形成,破其细胞壁,增加膜通透性,影响菌丝的正常生长。在对CMCB物质基础的研究中,化学成分大黄酸、黄芩苷、小檗碱的含量相对较高。