阿尔茨海默病（Alzheimer disease,AD）是一种以进行性认知功能障碍和行为损害为特征的中枢神经退行性病变,严重影响人们的健康。随着社会的人口老龄化,AD的发病率也不断上升,但目前尚缺乏有效的防治药物。AD的病因尚不清楚,发病机制非常复杂,近年来基于单一靶点或机制的药物研究频频失败。因此,基于新靶点、多靶点的AD研究成为热点。研究表明,AD是一种代谢性疾病,与糖脂代谢和能量代谢有关。中医认为“脾主运化”,与体内代谢密切相关。近年来,有学者提出“从脾胃论治”阿尔茨海默病,并发现健脾方药对AD有一定的作用。四君子汤来源于《太平惠民和剂局方》,有补气、益气健脾之功效,是健脾补脾基础方。有研究表明,四君子汤能改善AD大鼠的行为,促进AD大鼠中枢能量生成,改善中枢的能量代谢紊乱。然而,关于四君子汤调控Aβ跨血脑屏障和能量代谢的研究未见报道。本项目首先用Q-TOF-LC/MS对四君子汤水提液进行主成分分析,再运用基于计算机系统的网络药理学方法,构建成分-靶点网络及蛋白作用通路网络图,对四君子汤水提液抗AD作初步预测。以Aβ_25-35诱导的人脑微血管内皮细胞模拟AD损伤模型,探讨四君子汤水提物对Aβ_25-35诱导的细胞损伤、细胞凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase3）,Aβ跨血脑屏障转运相关蛋白——晚期糖基化终产物受体（Advanced glycation end products,RAGE）、低密度脂蛋白受体相关蛋白（Low density lipoprotein receptor-related protein 1,LRP1）,以及与能量代谢密切相关的转运蛋白——葡萄糖转运蛋白1（Glucose transporter-1,GLUT1）、葡萄糖转运蛋白3（Glucose transporter-3,GLUT3）的影响。使用MTT法检测四君子汤水提液对Aβ_25-35诱导的细胞存活率,实时定量PCR技术和免疫印迹试验测定四君子汤水提液对各基因m RNA和蛋白水平的表达情况,发现四君子汤水提液增加损伤细胞的存活率,升高损伤细胞中GLUT1、GLUT3、LRP1蛋白的表达,降低损伤细胞中Caspase3、RAGE蛋白的表达。研究结果表明,四君子汤水提液对Aβ损伤细胞有保护作用,能调控Aβ跨血脑屏障转运和内葡萄糖转运,从而降低Aβ在脑内异常聚集和沉积,改善脑能量代谢,为后期挖掘其预防AD的作用奠定基础。