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近年来,细菌耐药性问题已成为全球关注的公共卫生安全问题。鲜花与人类生活密切相关,然而,目前关于鲜花源细菌耐药情况的调查十分缺乏,鲜花是否会成为临床重要耐药菌/耐药基因的媒介仍不清楚。因此,本次实验以鲜花为研究对象,采集鲜花种植基地、花卉市场、医院附近的花店中鲜花样品,调查不同采样点鲜花源肠球菌的耐药情况,并进一步探究鲜花源肠球菌中质粒介导的利奈唑胺耐药基因optr A的流行特征与分子传播机制,以期为评估鲜花是否会成为携带重要耐药菌/耐药基因的潜在危险因子提供基础数据,也为控制耐药性传播提供新思路。本研究采集三个不同采样点鲜花样品共974份,分离肠球菌223株,分离率为22.9%,共分离到5种不同菌种的肠球菌,其中,粪肠球菌分离率最高（56.1%,125/223）,其次是屎肠球菌（23.8%,53/223）和蒙氏肠球菌（17.9%,40/223）。肠球菌在种植基地分离率最高（35.9%）,花卉市场次之（21.9%）,医院附近花店最低（4.2%）,但是不同菌种的肠球菌在不同采样点中分离率基本无差异。采用琼脂稀释法对223株肠球菌进行药物敏感性试验。结果显示,肠球菌对克林霉素、环丙沙星及杆菌肽等多种受试抗菌药物耐药率达将近50%或以上,对氟苯尼考及利福平耐药率相对较低,分别为14.7%和25.6%,对利奈唑胺耐药水平最低,为4.3%（n=9）。分析不同采样点来源的肠球菌耐药情况,发现除四环素和阿奇霉素外,整体上呈现花店来源菌株的耐药率最高、种植基地次之、花卉市场最低的趋势。分析不同菌种的肠球菌耐药情况,发现粪肠球菌和屎肠球菌对除氟苯尼考外的其它抗菌药物的耐药率均高于其它菌种肠球菌包括蒙氏肠球菌。采用PCR方法检测223株肠球菌中常见耐药基因,发现erm（B）,tet（L）,tet（M）的检出率较高,均达到45.0%以上,其次是bcr B（29.2%）和erm（A）（18.4%）,接着是optr A,fex A和aph（3"）-IIIa检出率均接近14.0%（n=31）,其它耐药基因均低于11.0%,未检测到cfr,cfr B,cfr C及poxt A等重要耐药基因。各类耐药基因在不同采样点之间检出率整体呈现基本相同的流行趋势,即花店样品中检出率最高,种植基地次之,而花卉市场样品检出率最低。此外,发现erm（B）,bcr B,氨基糖苷类以及四环素类耐药基因的检出率在粪肠球菌和屎肠球菌中均高于其它菌种肠球菌（包括蒙氏肠球菌）,然而,optr A、fex A以及erm（A）,检出率则相反,在其它菌种肠球菌中较高。31株optr A阳性肠球菌,仅有9株对利奈唑胺耐药,但均呈现为多重耐药表型,且携带多个耐药基因,其中最常见的耐药基因组合为erm（B）-erm（A）-fex A-tet（L）-tet（M）-aph（3"）IIIa-ant（6’）-Ia-bcr B（n=9）和erm（B）-fex A-tet（L）-tet（M）-aph（3"）IIIa-ant（6’）-Ia-bcr B（n=8）,此外,还发现多个耐药基因包括fex A、erm（B）、erm（A）及bcr B等在optr A阳性菌株中携带率明显高于optr A阴性菌株。进一步对阳性菌中optr A基因突变位点进行检测,共发现四种突变类型,其中菌株中optr A基因发生RDK突变多表现对利奈唑胺耐药。采用PFGE和MLST方法分析31株optr A阳性肠球菌的亲缘关系,22株粪肠球菌共分为8个PFGE谱型及7个ST型,其中ST202（n=6）、ST376（n=6）型为优势ST型,且在同一或不同采样点之间均存在克隆传播。9株蒙氏肠球菌分为三个群系,均来自同一种植地,存在局部克隆传播。基因定位显示6株optr A阳性粪肠球菌中optr A基因位于质粒上,主要大小为70 kb,其中一株携带optr A质粒可发生接合转移,并且介导利奈唑胺耐药;其余25株optr A阳性肠球菌中optr A基因均位于染色体上。进一步根据PFGE及MLST谱型特征,挑选13株optr A阳性菌株进行二代测序,获得5种不同类型的optr A基因环境。在蒙氏肠球菌中,发现两种类型位于染色体上的optr A基因环境,分别为HAD-Tn558-ara C-optr A-Csp（n=2）和HAD-Tn558-ara Coptr A-erm（A）-Csp（n=1）。然而,在粪肠球菌中,发现两种类型位于染色体上的和一种类型位于质粒上的optr A基因环境,依次为HAD-Tn554-fex A-optr A-Csp（n=7）,fex Aoptr A（n=1）和IS1216E-fex A-optr A-ISEnfa1（n=2）。进一步分析发现,除一株外,其它蒙氏和粪肠球菌染色体上携带optr A基因的序列片段均插入在肠球菌染色体上编码DNA修复蛋白功能的rad C基因上,其插入位点及方式与Tn554家族介导的转座相似,暗示肠球菌染色体捕获optr A可能与Tn554,Tn558有关。综上所述,鲜花中肠球菌存在较高的分离率,菌株耐药情况较为严重,尤其是optr A基因存在一定的流行性,尽管仅部分菌株介导利奈唑胺耐药,但阳性菌株常携带多个常见耐药基因,均呈现多重耐药的表型。optr A基因的散播与菌株的克隆传播、Tn554及Tn558等介导的转座相关。因而,我们应当重视鲜花中耐药菌/耐药基因的污染,避免其成为重要耐药基因传播媒介,危害公众健康。