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目的:银屑病是一种常见并易复发的慢性炎症性皮肤病,常终生存在。目前银屑病的患病率约1.5~3%,且呈逐年上升趋势。男女发病率无显著差异。发病年龄以青壮年为多,初发年龄在10~39岁的占86%。除疾病本身外,银屑病影响患者的工作、自尊心,降低患者的生活质量。但其发病机制至今不清楚,可能与遗传、环境、免疫、内分泌和神经精神等多种因素相关。多倾向认为是多基因遗传背景下的Th1细胞介导的免疫性疾病。但最近研究发现,在寻常型银屑病患者的皮损中Th17细胞百分比含量增高,认为Th17细胞及相关细胞因子与银屑病发病有关。但具体机制还不明了。此外,关于Th17细胞及相关细胞因子在银屑病外周血循环中的表达,研究结果也存在互相矛盾。对新鲜皮肤组织中Th17细胞相关细胞因子IL-17A的定量及其与疾病活动情况、疾病严重程度的关系,目前国内外文献报道尚少。而对银屑病皮损组织中IL-23R的表达情况及其与IL-17A、疾病严重程度的相关性分析尚未见报道。本研究拟用RT-PCR检测寻常型银屑病患者皮损活检组织中Th17细胞相关因子IL-17A mRNA及IL-23R mRNA水平,流式细胞仪检测外周血中Th17细胞的含量。并对所测细胞及细胞因子水平与银屑病病情严重程度进行相关性分析,探讨Th17细胞与寻常型银屑病发病机制的关系。
方法:⑴观察对象:实验组:入选要求为:新发并未接受过治疗或者是实验前没有接受系统药物治疗2周以上及外用药治疗1周以上的、有典型临床表现并经病理检查确诊的寻常型银屑病患者。共25例,其中男16例,女9例,年龄3~56岁,病程1周~10年。11例为首发患者,另14例为近2周未接受系统药物治疗及近1周未接受外用药治疗。实验组PASI评估分数为2.4~45.3分。平均12.980±12.501,其中PASI<10分列为轻度,共14例;PASI≥10分为中重度,共11例。对照组:为整形外科切除的正常皮肤组织,共14例。其中男9例,女5例。⑵实验组均取皮损处活检组织,并立即将组织在RNAlater液-20℃低温保存。⑶共收集了20例实验组患者及10例正常对照人外周静脉肝素抗凝血,将外周血提取单个核细胞后-80℃保存。⑷采用RT-PCR方法对组织中Th17细胞相关细胞因子IL-17A mRNA及IL-23RmRNA水平进行半定量检测。⑸用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞中CD4+IL-17+T细胞百分比含量。
结果:㈠皮肤组织IL-17A mRNA、IL-23R mRNA水平及与PASI相关性分析。⑴25例患者及14例正常对照人的皮损中IL-17AmRNA水平分别为0.996±0.231和0.437±0.096(t=10.572,p<0.01),IL-23R mRNA水平分别为1.006±0.339和0.491±0.196(t=6.015,p<0.01)。⑵11例中重度患者与14例轻度患者皮损中的IL-17A mRNA水平分别为1.129±0.210和0.891±0.195(t=-2.918,p<0.01),IL-23R mRNA的水平分别为和1.265±0.307和0.803±0.197(t=-4.572,p<0.01)。⑶实验组皮损中IL-17A mRNA水平与PASI评分呈线性正相关(r=0.671,p<0.001)。其中轻度与中重度患者皮损中IL-17A mRNA水平分别与PASI评分呈线性正相关(r=0.623、0.627,both p<0.05)。实验组皮损中IL-23R mRNA水平与PASI评分呈线性正相关(r=0.705,p<0.05)。其中中重度患者皮损中IL-23R mRNA水平与PASI评分呈线性正相关(r=0.845,p=0.001),但轻度患者皮损中IL-23R mRNA水平与PASI评分无相关(r=0.231,p=0.427)。皮损中IL-17A mRNA水平与IL-23RmRNA水平呈线性正相关(r=0.465,p=0.019)。㈡外周血中CD4+IL-17+T细胞含量与PASI相关性分析。20例患者和10例正常对照人群外周血中CD4+IL-17+T细胞的百分率分别为1.720±0.196和1.827±0.875,差异无统计学意义(t=0.358,p>0.7),且实验组外周血中CD4+IL-17+T细胞的百分比与PASI评分不相关(r=0.132,p>0.05)。
结论:①寻常型银屑病患者存在皮肤局部T细胞免疫调节失衡,Th17细胞相关细胞因子IL-17A及IL-23R参与介导寻常型银屑病的发病。②在中重度寻常型银屑病患者皮损局部可能存在表达IL-23R的其它记忆T细胞和(或)不表达IL-23R的Th17细胞参与发病。③寻常型银屑病患者外周血中Th17细胞数量无明显异常,可能是Th17细胞趋化迁移至皮肤组织或者银屑病外周血Th17细胞为活化的、效应性T细胞,而正常人外周血中Th17存在功能异常或无功能。