【摘 要】
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本研究以制备汞的多克隆抗体为目的,将牛血清白蛋白(BSA)与汞离子通过谷胱甘肽偶联,合成了完全抗原Hg-GSH-BSA,将卵黄原蛋白(OVA)与汞离子通过青霉素G钠盐偶联,合成了完全抗
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本研究以制备汞的多克隆抗体为目的,将牛血清白蛋白(BSA)与汞离子通过谷胱甘肽偶联,合成了完全抗原Hg-GSH-BSA,将卵黄原蛋白(OVA)与汞离子通过青霉素G钠盐偶联,合成了完全抗原Hg-青霉素-OVA。以Hg-GSH-BSA作为免疫原,免疫新西兰大白兔一段时间后,采取动物的血清,用Hg-青霉素-OVA作为包被原,包被酶标板,采用间接ELISA法测定血清效价并对其进行鉴定,结果表明:采集到的血清中含有针对汞的抗体,血清效价为1∶204 800。在获得抗体的基础上,对运用抗体建立间接竞争ELISA检测的方法进行了初步探索,考察了ELISA检测方法的其中五个影响因子,确定的最佳检测条件为:包被抗原500倍稀释,抗血清12 000倍稀释,3%脱脂奶粉作为封闭剂,酶标二抗3000倍稀释,0.5mmol/L EDTA为螯合剂。以抑制率I为纵坐标,Hg2+浓度对数(lgC)为横坐标,建立检测曲线,得到线性回归方程为:Y= 0.1874X-0.0499,相关系数为0.9739,其中Y为抑制率,X为Hg2+浓度对数(lgC),检测限为0.0065mg/L。本研究成功制备了抗汞多克隆抗体,初步探索了汞的ELISA检测方法,为进一步的研究工作奠定了实验基础。
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